[发明专利]一种捕获肠癌循环肿瘤细胞的方法

权利要求书

1.一种从生物体液富集或分离结直肠癌循环肿瘤细胞的方法，其包括如下步骤：

1)任选地将所述生物体液，例如血液通过物理分离方法如尺寸分离过滤去除杂细胞如红细胞、血小板和白细胞和血浆蛋白；

2)任选地通过与特异性结合一种或多种白细胞生物标记如CD45、CD16、CD66b的一种或多种结合剂接触去除白细胞；

3)通过与特异性结合A33的结合剂接触形成A33结合剂与循环肿瘤细胞的复合物。

2.权利要求1所述的方法，其中所述结合剂选自由抗体或其抗原结合片段，单克隆抗体或多克隆抗体，合成抗体，单链抗体组成的组，优选地，所述结合剂是单克隆抗体。

3.根据权利要求1-2任一项的方法，其中所述结合剂与固体表面或载体直接或间接相连，优选地，通过生物素-链霉亲和素或生物素-亲和素相互作用间接相连。

4.根据权利要求3的方法，其中所述固体表面或载体选自颗粒物、膜、柱、磁珠、树脂及其任意组合,优选地，所述载体是磁珠。

5.根据权利要求1的方法，其中所述生物体液包括：血液、腹水、腹水液、胸腔积液、或其任意组合。

6.根据权利要求1-2任一项的方法，其中所述结合剂用磁性、荧光或放射性标记进行标记。

7.根据权利要求1-6任一项的方法富集或分离的结直肠癌循环肿瘤细胞。

8.特异性结合A33的结合剂用于制备结直肠癌循环肿瘤细胞的富集、分离或检测试剂的用途。

9.权利要求8所述的用途，其中所述结合剂是选自由抗A33的抗体或其抗原结合片段，单克隆抗体或多克隆抗体，合成抗体，单链抗体组成的组，优选地，所述结合剂是抗A33的单克隆抗体。

10.根据权利要求8-9任一项的用途，其中所述结合剂与固体表面或载体直接或间接相连，优选地，通过生物素-链霉亲和素或生物素-亲和素相互作用间接相连。

11.根据权利要求10的方法，其中所述固体表面或载体选自颗粒物、膜、柱、磁珠、树脂及其任意组合,优选地，所述载体是磁珠。

12.根据权利要求8-9任一项的用途，其中所述结合剂用磁性、荧光或放射性标记进行标记。

13.一种用于从生物体液中富集或分离结直肠癌循环肿瘤细胞的试剂盒，其包括特异性结合A33的结合剂，任选地还包括用于去除杂细胞如红细胞、血小板和白细胞的结合剂，优选地，所述生物体液包括：血液、腹水、腹水液、胸腔积液、或其任意组合。

14.权利要求13所述的试剂盒，其中所述结合剂选自由抗体或其抗原结合片段，单克隆抗体或多克隆抗体，合成抗体，单链抗体组成的组，优选地，所述结合剂是单克隆抗体。

15.根据权利要求13-14任一项的试剂盒，其中所述结合剂与固体表面或载体直接或间接相连，优选地，通过生物素-链霉亲和素或生物素-亲和素相互作用间接相连。

16.根据权利要求15的试剂盒，其中所述固体表面或载体选自颗粒物、膜、柱、磁珠、树脂及其任意组合,优选地，所述载体是磁珠。

17.根据权利要求13-16任一项的试剂盒，其中所述结合剂用磁性、荧光或放射性标记进行标记。