[发明专利]一种Trizol快速提取核酸DNA和/或RNA的方法

权利要求书

1.一种Trizol快速提取核酸DNA和/或RNA的方法，其特征在于，

1)同时提取DNA和RNA时包括以下操作步骤：

(1)取小于50mg新鲜材料置于研磨器中，加入0.5mL Trizol试剂，快速研磨粉碎，然后转移到1.5mL去RNA酶的离心管中，不断颠倒混匀，直至溶液清亮；

(2)加入600μL分离液，其中分离液由100-200μL氯仿、100-300μL乙醇、100-200μL异丙醇组成，振荡混匀；

(3)将振荡混匀后的溶液分两次转移到已放入收集管的收集柱内12000rpm离心1min，每次离心后倒掉收集管中的液体；

(4)向收集柱中加入600μL的纯化液1，其中纯化液1包括0.05-0.3M柠檬酸钠、5％-30％乙醇的DEPC水，12000rpm离心处理1min，倒掉收集管中的液体，然后再向收集柱中加入600μL的纯化液1，12000rpm离心处理1min，倒掉收集管中的液体；

(5)向收集柱内加入500μL的纯化液2，其中纯化液2为含70％-80％乙醇的DEPC水，12000rpm离心处理2min；

(6)小心取出收集管，将收集柱转移到一个新的离心管中，加入100μL DEPC水溶解10min后，12000rpm离心2min，得到含有DNA和RNA的核酸溶液；

2)提取RNA时包括以下操作步骤：

(1)取小于50mg新鲜材料置于研磨器中，加入0.5mL Trizol试剂，快速研磨粉碎，然后转移到1.5mL去RNA酶的离心管中，不断颠倒混匀，直至溶液清亮；

(2)加入100μL氯仿，振荡混匀，室温静置5min，12000rpm离心5min；

(3)将上层水相转移到已放入收集管的收集柱内，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的液体；

(4)向收集柱中加入600μL的纯化液1，12000rpm离心处理1min后，倒掉收集管中的液体，然后再向收集柱中加入600μL的纯化液1，12000rpm离心处理1min后，倒掉收集管中的液体；

(5)向收集柱内加入500μL的纯化液2，12000rpm离心处理2min后；

(6)小心取出收集管，将收集柱转移到一个新的离心管中，加入100μL DEPC水溶解10min后，12000rpm离心2min，得到含有RNA的核酸溶液；

3)提取DNA时包括以下操作步骤：

(1)取小于50mg新鲜材料置于研磨器中，加入0.5mL Trizol试剂，快速研磨粉碎，然后转移到1.5mL去RNA酶的离心管中，不断颠倒混匀，直至清亮；再向其中加入100μL氯仿，振荡混匀，室温静置5min，12000rpm离心5min；

(2)将上层水相去除干净，颠倒混匀下层溶液，加入300μL分离液，其中分离液由50-100μL氯仿、50-150μL乙醇、50-100μL异丙醇组成，振荡混匀；

(3)将溶液转移到已放入收集管的收集柱内，12000rpm离心处理1min后，倒掉收集管中的液体。

(4)向收集柱中加入600μL的纯化液1，12000rpm离心处理1min后，倒掉收集管中的液体，然后再向收集柱中加入600μL的纯化液1，12000rpm离心处理1min后，倒掉收集管中的液体；

(5)向收集柱内加入500μL的纯化液2，12000rpm离心处理2min后；

(6)小心取出收集管，将收集柱转移到一个新的离心管中，加入100μL ddH₂O或TE缓冲溶液，溶解10min后，12000rpm离心2min，得到含有DNA的核酸溶液。

2.根据权利要求1所述的一种Trizol快速提取核酸DNA和/或RNA的方法，其特征在于，所述新鲜材料包括组织、细胞、血液、血浆、分泌物、培养液中的任意一种。