[发明专利]一种固相合成Alloferon-2的方法在审
申请号: | 201911325903.6 | 申请日: | 2019-12-20 |
公开(公告)号: | CN110903349A | 公开(公告)日: | 2020-03-24 |
发明(设计)人: | 李婉珍;宋平;张伟伟;葛飞;朱龙宝;陶玉贵 | 申请(专利权)人: | 安徽工程大学 |
主分类号: | C07K7/08 | 分类号: | C07K7/08;C07K1/06;C07K1/04 |
代理公司: | 安徽知问律师事务所 34134 | 代理人: | 金贝贝 |
地址: | 241000 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 相合 alloferon 方法 | ||
1.一种固相合成Alloferon-2的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:
1)首先向反应器中投加二氯树脂作为固相载体,而后加入第一个氨基酸,以DCM做溶剂,加入DIEA反应一段时间;
2)步骤1)反应结束后DMF洗涤,加入试剂封闭未反应的-OH;
3)向步骤2)处理后的树脂中加入哌啶DMF溶液进行脱保护;
4)将下一个氨基酸和HOBT的混合物投入至反应器中,加入DIC反应一段时间;
5)加入哌啶DMF溶液脱保护,重复上述步骤直至延伸结束,完成多肽粗品的合成;
6)向所述的多肽粗品中加入切割液,恒温震荡一段时间,乙醚离心,得到粗产物。
2.根据权利要求1所述的固相合成Alloferon-2的方法,其特征在于:所述切割液投加条件为:按照10mL/g的比例向所述多肽粗品中投加。
3.根据权利要求1或2所述的固相合成Alloferon-2的方法,其特征在于:所述步骤1)之前还包括预处理步骤:将所述的二氯树脂首先采用DCM浸泡。
4.根据权利要求3所述的固相合成Alloferon-2的方法,其特征在于:所述封闭未反应的-OH的具体步骤为:首先以DCM溶剂、甲醇和DIEA的混合溶液封闭处理30min,结束后洗涤,再用DCM溶剂、醋酸酐和DIEA的混合溶液封闭处理60min。
5.根据权利要求4所述的固相合成Alloferon-2的方法,其特征在于:所述切割液由TFA、EDT、TIPS和水组成,所述的TFA:EDT:TIPS:水的体积比为95:2:2:1。
6.根据权利要求5所述的固相合成Alloferon-2的方法,其特征在于:所述步骤4)中的哌啶DMF溶液中哌啶与DMF体积比为1:4。
7.根据权利要求6所述的固相合成Alloferon-2的方法,其特征在于:所述步骤1)中加入DIEA反应时间为90min,所述步骤4)中加入DIC后反应的时间为60分钟。
8.根据权利要求7所述的固相合成Alloferon-2的方法,其特征在于:所述步骤6)中恒温震荡的时间为240min。
9.根据权利要求1或2所述的固相合成Alloferon-2的方法,其特征在于:所述脱保护的操作具体为:首先使用哌啶DMF溶液脱保护10分钟后,抽干溶液再重新加入哌啶DMF溶液重新脱保护5分钟。
10.根据权利要求9所述的固相合成Alloferon-2的方法,其特征在于:所述脱保护步骤完成后,洗涤、抽干,加入茚三酮、苯酚、吡啶,100℃加热3分钟,显色,根据显色情况判断是否需要重新投料。
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