[发明专利]一种微纳颗粒浓度的检测方法

说明书

一种微纳颗粒浓度的检测方法，包括：将待测微纳颗粒与一种或多种标记物相结合生成新颗粒，新颗粒在颗粒大小、电荷状态、颗粒形态中的至少一种与待测微纳颗粒或标记物相比发生变化；检测新颗粒与待测微纳颗粒或标记物的颗粒大小、电荷状态或颗粒形态，并对新颗粒与待测微纳颗粒或标记物分别进行计数获得各自计数结果，并基于计数结果计算得到与标记物发生结合的待测微纳颗粒的浓度。本发明的方法具有检测准确度高、检测限低、化学试剂稳定的优点。

技术领域

本发明涉及颗粒检测技术领域，尤其涉及一种微纳颗粒浓度的检测方法。

背景技术

液体中颗粒的浓度作为一项重要的物理参数，在医药、半导体、涂料墨水、过滤等行业标准里对颗粒浓度范围有明确的规定。颗粒浓度检测是一项非常重要的基础工作。颗粒浓度检测广泛应用于水泥、陶瓷、药品、乳液、涂料、染料、颜料、填料、化工产品、催化剂、钻井泥浆、磨料、润滑剂、煤粉、泥砂、粉尘、细胞、细菌、食品、添加剂、农药、炸药、石墨、感光材料、燃料、墨汁、金属与非金属粉末、碳酸钙、高岭土、水煤浆及其他粉状物料。

对于纳米颗粒浓度的测量，阻抗检测技术能实现单个颗粒特征的有效识别等明显优势，但是阻抗法库尔特原理只能测量微粒的等效粒径，无法测量粒子的电位和形态。同时阻抗法对小尺寸的微粒的测量精度不高。

比色法，是通过朗伯-比尔定律对溶液中悬浮颗粒对光的吸收度与浓度成正比的原理进行测试，但是这种方法的准确度受限于吸光强度，仅在吸光度为1～2的范围比较准确，无法测量较低浓度的微粒。

荧光法和化学发光法，都是通过特异性的发光基团对目标颗粒进行标记，通过发光强度来检测目标颗粒的浓度，一方面检测设备的成本比较高，另一方面存在发光基团的化学试剂的稳定性问题。

发明内容

本发明提供一种全新的基于单颗粒的微纳颗粒浓度的检测方法，具有检测准确度高、检测限低、化学试剂稳定的优点。

根据本发明的第一方面，本发明提供一种微纳颗粒浓度的检测方法，该方法包括：

将待测微纳颗粒与一种或多种标记物相结合生成新颗粒，上述新颗粒在颗粒大小、电荷状态、颗粒形态中的至少一种与上述待测微纳颗粒或上述标记物相比发生变化；

检测上述新颗粒与上述待测微纳颗粒或上述标记物的颗粒大小、电荷状态或颗粒形态，并对上述新颗粒与上述待测微纳颗粒或上述标记物分别进行计数获得各自计数结果，并基于上述计数结果计算得到与上述标记物发生结合的上述待测微纳颗粒的浓度。

在优选实施例中，上述标记物是带特异官能团或特异性抗原或抗体的聚苯乙烯微球、磁珠、硅球或胶束。

在优选实施例中，上述特异官能团选自生物酶与底物、抗原与抗体、配基与受体以及生物素与亲和素。

在优选实施例中，上述待测微纳颗粒与上述标记物相结合的方法包括特异性抗原抗体结合、特殊的免疫化学反应、特异性化学合成反应、适配体的特异性结合。

在优选实施例中，上述待测微纳颗粒与上述标记物相结合的方式包括一个待测微纳颗粒与一个标记物结合、一个待测微纳颗粒与多个标记物结合、多个待测微纳颗粒与一个标记物结合。

在优选实施例中，上述待测微纳颗粒选自蛋白质、外泌体、病毒。

在优选实施例中，上述检测上述新颗粒与上述待测微纳颗粒或上述标记物的颗粒大小、电荷状态或颗粒形态的方法包括纳米粒子示踪(NTA)、可调电阻脉冲感测(TRPS)和单粒子脉冲技术以及显微镜成像法。

根据本发明的第二方面，本发明提供一种微纳颗粒提纯并检测浓度的方法，该方法包括：