[发明专利]一种微纳颗粒浓度的检测方法

权利要求书

1.一种微纳颗粒浓度的检测方法，其特征在于，所述方法包括：

将待测微纳颗粒与一种或多种标记物相结合生成新颗粒，所述新颗粒在颗粒大小、电荷状态、颗粒形态中的至少一种与所述待测微纳颗粒或所述标记物相比发生变化；

检测所述新颗粒与所述待测微纳颗粒或所述标记物的颗粒大小、电荷状态或颗粒形态，并对所述新颗粒与所述待测微纳颗粒或所述标记物分别进行计数获得各自计数结果，并基于所述计数结果计算得到与所述标记物发生结合的所述待测微纳颗粒的浓度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标记物是带特异官能团或特异性抗原或抗体的聚苯乙烯微球、磁珠、硅球或胶束。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述特异官能团选自生物酶与底物、抗原与抗体、配基与受体以及生物素与亲和素。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测微纳颗粒与所述标记物相结合的方法包括特异性抗原抗体结合、特殊的免疫化学反应、特异性化学合成反应、适配体的特异性结合。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测微纳颗粒与所述标记物相结合的方式包括一个待测微纳颗粒与一个标记物结合、一个待测微纳颗粒与多个标记物结合、多个待测微纳颗粒与一个标记物结合。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测微纳颗粒选自蛋白质、外泌体、病毒、聚苯乙烯微球、磁珠、硅球或胶束。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测所述新颗粒与所述待测微纳颗粒或所述标记物的颗粒大小、电荷状态或颗粒形态的方法包括纳米粒子示踪(NTA)、可调电阻脉冲感测(TRPS)和单粒子脉冲技术以及显微镜成像法。

8.一种微纳颗粒提纯并检测浓度的方法，其特征在于，所述方法包括：

将包含待测微纳颗粒的样本与一种或多种磁珠标记物在溶液中进行特异性结合，其中磁珠上带有与所述待测微纳颗粒特异性结合的抗原或抗体、适配体或特异官能团，使得结合物在颗粒大小、电荷状态、颗粒形态中的至少一种与所述待测微纳颗粒或所述磁珠标记物相比发生变化；

将上一步产生的混合液置于磁场区域中，使所述磁珠被磁力吸附在磁场中的局部区域，再加入清液替换掉所述磁场区域中的混合液，使所述样本中的非待测微纳颗粒随着所述混合液的替换被清理掉，使得所述磁场区域中的清液中只含有磁珠颗粒；

检测上一步得到的清液中与待测微纳颗粒结合的磁珠和未能与待测微纳颗粒结合的磁珠在颗粒大小、电荷状态或颗粒形态上的变化，并对所述与待测微纳颗粒结合的磁珠和未能与待测微纳颗粒结合的磁珠分别进行计数获得各自计数结果，并基于所述计数结果计算得到与所述磁珠发生结合的所述待测微纳颗粒的浓度。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述清液是不包含对磁珠的检测构成干扰的颗粒的液体。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述待测微纳颗粒选自蛋白质、外泌体、病毒、聚苯乙烯微球、磁珠、硅球或胶束。