[发明专利]一种清热养阴活血祛瘀口服液成分检测方法

说明书

本发明公开了一种清热养阴活血祛瘀口服液含量测定方法，包括：取口服液供试品溶液和标准品溶液进行HPLC检测，色谱条件：色谱柱为YMC Meteoric Core C18(100×3.0mm，2.7μm，8nm)，柱温25～40℃；以甲醇为流动相A，酸水溶液为流动相B，梯度洗脱；二极管阵列检测器，绿原酸检测波长为327nm，肉桂酸检测波长为278nm；记录色谱图，用外标法计算脉络宁口服液中绿原酸和肉桂酸含量。本发明方法大大缩短了检验用时、简便可行、快速准确、减少检验压力，具有良好的精密度、线性关系、稳定性、重复性，回收率高，耐用性良好，可以作为评价脉络宁口服液质量的有效方法。

技术领域

本发明属于分析化学领域，特别涉及一种清热养阴活血祛瘀口服液成分检测方法。

背景技术

脉络宁口服液由金银花、山银花、石斛、牛膝、玄参等5味药材制成，具有清热养阴、活血化瘀的作用。用于血栓闭塞性脉管炎、动脉硬化性闭塞症、脑血栓形成及后遗症、静脉血栓形成等病。药理研究显示：脉络宁口服液具有保护心、脑血管组织、抗血栓形成、改善微循环及改善血液流变性等作用。

脉络宁口服液的药学研究相对比较薄弱，现行标准中含量测定只检测玄参中的指标性成分肉桂酸，中国药典一部金银花和山银花均进行了绿原酸的鉴别和含量测定，原剂型脉络宁注射液中也规定检测绿原酸含量。随着检验仪器精密度的提高，可以同时测定多个不同类型成分。因此，申请人拟在测定肉桂酸的同时，增加一个金银花和山银花共有的指标成分绿原酸的测定。目前，相关脉络宁口服液含量测定所用的色谱条件均是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱，梯度洗脱，检测时间约为60分钟。实际检验过程中，考虑到多批次同时检测、样品稳定性等因素，存在检测用时过长、测定结果易出现偏差等情况。

发明内容

本发明的目的在于提供一种清热养阴活血祛瘀口服液成分的含量测定方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

一种清热养阴活血祛瘀口服液含量测定方法，包括：取脉络宁口服液供试品溶液以及标准品溶液进行HPLC测定，HPLC检测的色谱条件为：

色谱柱为YMC Meteoric Core C18(100mm×3.0mm，2.7μm，8nm)，柱温为25～40℃；以甲醇为流动相A，酸的水溶液为流动相B，梯度洗脱程序为：0～7min，15％A；7～8min，15％A→45％A；8～12min，45％A→55％A；12～17min，55％A；流动相流速为0.4～0.6mL/min，优选为0.45～0.55mL/min；二极管阵列检测器，绿原酸检测波长为327nm，肉桂酸检测波长为278nm；理论板数按肉桂酸峰计算均应不低于5000。

记录色谱图，用外标法计算脉络宁口服液中绿原酸和肉桂酸含量。

YMC Meteoric Core C18(长度100mm×内径3.0mm，粒径2.7μm，微孔径8nm)为小粒径、小口径核壳型色谱柱。其填料为核壳型材料，由坚硬的内核和多孔外壳组成，待分析物进入核壳型材料填充的色谱柱后，只需单纯通过环绕在填料颗粒表面的薄的多孔壳层。与整个全多孔填料颗粒相比，待分析物扩散要快，在填料颗粒孔道和流动相二者之间的平衡时间得以减少，即减少传质阻抗。使用YMC Meteoric Core色谱柱对脉络宁口服液中绿原酸、肉桂酸进行含量测定，不仅可以将样品检测时间缩短至20分钟，且绿原酸、肉桂酸分离效果好，大大降低了检测成本。

所述的酸为磷酸、甲酸或冰乙酸中的一种或两种以上的混合；优选为磷酸。

所述的酸水溶液中酸的体积百分数为0.05％～0.2％，优选为0.1％～0.2％。

所述的脉络宁口服液供试品溶液的制备方法：精密量取脉络宁口服液1mL，置于25mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

所述的标准品溶液的制备方法：取绿原酸、肉桂酸对照品，精密称定，50％甲醇定容。