[发明专利]金钱鱼催产用激素试剂盒及批量获得金钱鱼受精卵的人工催产和授精方法有效
申请号: | 201911309121.3 | 申请日: | 2019-12-18 |
公开(公告)号: | CN111000987B | 公开(公告)日: | 2022-09-09 |
发明(设计)人: | 黄洋;李广丽;朱春华;江东能;陈华谱;石红娟;田昌绪;邓思平;吴天利 | 申请(专利权)人: | 广东海洋大学 |
主分类号: | A61K38/24 | 分类号: | A61K38/24;A61K31/454;A61P15/08;A01K61/10 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 董大媛 |
地址: | 524088 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金钱 催产 激素 试剂盒 批量 获得 受精卵 人工 授精 方法 | ||
1.一种基于金钱鱼催产用激素试剂盒进行批量获得金钱鱼受精卵的人工催产和授精方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)选择2龄以上、鱼体健康经促熟培育的雌性亲鱼和雄性亲鱼作为待催产亲鱼,将所述雌性亲鱼和雄性亲鱼分开放置;
2)对雌性亲鱼进行第一针激素注射,每1kg体重的雌性亲鱼注射促性腺激素释放素A43~5μg和马来酸地欧酮3~5mg,雄性亲鱼不注射;
3)距第一针激素注射后20~30h进行第二针激素注射,每1kg体重的雌性亲鱼注射促性腺激素释放素A4 5~10μg和马来酸地欧酮5~10mg,每1kg体重的雄性亲鱼注射促性腺激素释放素A4 3~5μg;
4)距所述第二针激素注射后20~30h进行第三针激素注射,每1kg体重的雌鱼亲本注射促性腺激素释放素A415~30μg、绒毛膜促性腺激素500~1000IU和马来酸地欧酮10~20mg,每1kg体重的雄鱼亲本注射促性腺激素释放素A4 5~10μg;
5)距所述第三次注射激素后6~12h,分别采集精子和卵子进行人工授精,向得到的受精卵加入新鲜海水静置,将上浮的受精卵置于新鲜海水中充气孵化;
所述试剂盒包括独立分装的促性腺激素释放素A4、马来酸地欧酮和人绒毛膜促性腺激素。
2.根据权利要求1所述人工催产和授精方法,其特征在于,所述雌性亲鱼的选择标准为雌鱼性腺发育至Ⅳ期,腹部饱满微膨大的金钱鱼;
所述雄性亲鱼的选择标准为压腹部靠近生殖孔位置有白色精液流出的金钱鱼雄鱼。
3.根据权利要求1或2所述人工催产和授精方法,其特征在于,所述雌性亲鱼和雄性亲鱼的尾数比为1:2~3。
4.根据权利要求1所述人工催产和授精方法,其特征在于,所述第一针激素注射、第二针激素注射和第三针激素注射的位置为在胸鳍基部凹陷处腹腔注射。
5.根据权利要求1所述人工催产和授精方法,其特征在于,所述促性腺激素释放素A4、马来酸地欧酮和绒毛膜促性腺激素均用质量分数0.9%生理盐水溶解成混合药液;每条亲鱼注射混合药液的体积为0.3~1ml。
6.根据权利要求1所述人工催产和授精方法,其特征在于,采集精子的方法为擦干雄鱼体表水分,挤压雄鱼腹部收集精液,前段混有尿液的精液丢弃不用,用4℃预冷0.9%生理盐水按1:50~100的比例稀释精液;
采集卵子的方法为待雌鱼腹部膨大生殖孔突出,挤压腹部使透明分散卵粒流入新鲜海水中,操作时间不超过1分钟。
7.根据权利要求1或6所述人工催产和授精方法,其特征在于,所述人工受精时,卵子和精子原液的体积比为500~1000:1。
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