[发明专利]一种注射用盐酸头孢替安有关物质的检测方法

说明书

本发明公开了一种应用高效液相色谱法检测注射用盐酸头孢替安有关物质的方法，色谱条件为：色谱柱以氰基键合硅胶为填充剂，以乙腈‑磷酸盐缓冲液为流动相进行梯度洗脱，以紫外检测器为检测器，准确地实现了盐酸头孢替安有关物质的分离，为盐酸头孢替安中单个杂质的检测提供了简单可靠的方法。

技术领域

发明涉及药物技术领域，具体涉及抗生素盐酸头孢替安的检测方法，特别涉及一种注射用盐酸头孢替安有关物质的检测方法。

背景技术

盐酸头孢替安，Cefotiam Dihydrochloride ，其化学名称为(6R，7R)–7-[[(2-氨基-4-噻唑基)乙酰基]氨基]-3-[[1-[2-（二甲氨基）乙基]-1H-四唑-5-基]硫代甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸二盐酸盐。注射用盐酸头孢替安为盐酸头孢替安与无水碳酸钠的混粉。

其化学结构式如下：

盐酸头孢替安为第二代头孢菌素类抗生素，其抗菌作用机理是阻碍细菌细胞壁的合成。它对革兰阴性菌和阳性菌均具有广泛的抗菌作用。

头孢替安的合成工艺如下：

。

根据合成工艺可以推断分析出盐酸头孢替安可能存在的有关物质，详见下表：

盐酸头孢替安原料及制剂在中华人民共和国药典（CHP2015）、欧洲药典及英国药典（BP）中均未收载，仅收载于美国药典（USP40）和日本药局方（JP17）中，但在 USP40 和JP14中的原料和制剂标准均未检查有关物质。

目前报道的头孢替安有关物质条件的文献有海南医学院学学报2018，24（19），1707-1711，采用C18甲醇-醋酸胺体系梯度体系，及中国新药杂质，2019，28（5），513-522，采用乙腈-磷酸氢二钠-磷酸二氢钾梯度体系，这两个体系都是只包含我们上述所列杂质的部分杂质，采用上述文献条件均存在已知待测组分与已知待测组分之间难以分离，或者待测已知组分与未知组分难以分离的情况，因此，需要开发新的流动相使组分之间得以有效分离。

发明内容

基于上述文献的条件，无法实现待测组分的有效分离，即使在此基础上作进一步优化分离，也难以实现杂质的有效分离。

有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是：开发可以有效分离上述已知杂质的有关物质检测方法。

为实现上述目的，本发明提供一种注射用盐酸头孢替安有关物质的检测方法，其特征在于，所述检测方法采用高效液相色谱法进行，采用以氰基键合硅胶为填充剂的色谱柱，以磷酸盐缓冲液水溶液和乙腈为流动相，采用梯度程序洗脱、以紫外检测器为检测器，所涉及的有关物质包括杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H，杂质I，杂质J/ K。

进一步地，所述的流动相中缓冲盐水溶液与乙腈的体积比为75～97：3～25，进行梯度洗脱；流速为0.9～1.1mL/min；所述紫外检测器检测波长为254 nm；所述色谱柱的柱温为35～45℃；所述磷酸盐缓冲盐水溶液中的浓度为0.05 mol/L；所述缓冲盐水溶液的pH范围为4.4～4.8；所述缓冲盐水溶液中添加0.02%庚烷磺酸钠，以加强杂质的分离；所述CN色谱柱可以是岛津Inertsil CN-3或伊利特 Hypersil CN。

进一步地，上述方法还包括下列操作：

（1）取注射盐酸头孢替安和杂质（杂质A~K）适量，用流动相作稀释剂稀释，配成混合溶液；

（2）取注射盐酸头孢替安适量，用流动相作稀释剂稀释，配成每1 mL含头孢替安1mg/mL的溶液作为供试液；

（3）取所述供试液1mL置100mL容量瓶中定容至刻度，作为对照液；