[发明专利]一种甘蔗尾叶青贮用复合菌剂

权利要求书

1.一种甘蔗尾叶青贮用复合菌剂，其特征在于：它的活性成分包括矮小假丝酵母菌（Candida humils）GS2、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）GS3、干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）GS4、副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）GS5；

所述矮小假丝酵母菌（Candida humils）GS2于2018年7月02日保藏在中国，武汉，武汉大学，中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2018441；

植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）GS3于2018年08月03日保藏在中国，武汉，武汉大学，中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2018522；

干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）GS4于2018年08月03日保藏在中国，武汉，武汉大学，中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2018523；

副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）GS5于2018年08月03日保藏在中国，武汉，武汉大学，中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2018524；

所述矮小假丝酵母菌（Candida humils）GS2、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）GS3、干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）GS4、副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）GS5以活菌数百分比计，比例为20%:60%:10%:10%。

2.根据权利要求1所述的一种甘蔗尾叶青贮用复合菌剂的制备方法，其特征在于：具体包括以下步骤：

（1）、活化：提取4种菌种分别按照菌种10%添加量分别接入液体培养基，矮小假丝酵母菌（Candida humils）GS2培养温度为28 ℃24h，150r/min摇床培养；植物乳杆菌（Lactobacillus plantarumGS3）、干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）GS4、副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）GS5温度为37℃24h，静态培养；

（2）、扩大培养：接着将活化后的4种菌株按照5％添加量分别接入液体培养基，矮小假丝酵母菌（Candida humils）GS2培养温度为28 ℃24h，150r/min摇床培养；植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）GS3、干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）GS4、副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）GS5培养温度为37℃24h，静态培养，用涂板对接种菌液进行计数；

（3）、冷冻干燥：用95%乙醇擦拭离心机内壁做杀菌处理，用灭菌离心管将浓缩培养的菌发酵液按照4种菌株的浓度比例混合后，于3000r/min 下离心20min时间，弃上清液得菌泥，用适量的无菌水同菌泥充分混匀，制得浓度均匀的菌悬液，添加保护剂，菌泥：保护剂=1:3，一起转入无菌培养皿，厚度为皿高的一半，用保鲜膜包裹，置于超低温冰箱中预冻5h,形成小的冰晶，立即转入冷冻干燥装置中干燥，直到没有明水为止，取样测定此时活菌数，立即真空密封包装后于4℃冰箱保藏。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述保护剂按照百分数计，由以下组分组成80%无脂奶粉、8% 海藻糖、8% 谷氨酸钠、4%甘油。