[发明专利]一种具有沙漠土壤保湿功能的蓝藻培养方法

说明书

本发明涉及一种具有沙漠土壤保湿功能的蓝藻培养方法。该方法按下述步骤进行：第一步，分离出保湿藻培养物；第二步，将单个保湿藻藻丝接种在固体平板上重复培养直至接种5代至7代，得藻体，第三步，将藻体接种到液体培养基中，规模化开放式培养7天至21天。本发明先对保湿藻进行培养，提高细胞浓度，获得细胞浓度高的保湿藻培养液后再进行分离，然后进行纯化获得高产的目的藻种后，最后进行大规模的工业化培养，这样能保证成功分离目的藻株，并且本发明所提到的保湿藻培养方法简单，适合大规模培养，保持保湿藻细胞的生理生化特性，能够作为治沙保湿中的理想材料。

技术领域

本发明涉及微生物藻类的培养方法，是一种具有沙漠土壤保湿功能的蓝藻培养方法。

背景技术

蓝藻(Blue-green Algae)是一门藻类植物；能进行光合作用放氧的原核生物。单细胞个体或群体、或为细胞成串排列组成藻丝(细胞裂)的丝状体，不分枝、假分枝或真分枝。具核质，无核膜；色质区主要由类囊体及其有关结构，藻胆体和糖原颗粒等所组成，具叶绿素a、藻胆素、胡萝卜素、类胡萝卜素等光合色素，但无叶绿体膜，不形成叶绿体；具细胞壁。蓝藻在地球上已存在约30亿年，是最早的光合放氧生物。蓝藻有极大的适应性，分布很广。淡水和海水中，潮湿和干旱的土壤或岩石上、树干和树叶上、温泉中、冰雪上，甚至在盐卤池、岩石缝中都有它们的踪迹；有些还可以生存在深层土壤中。塔克拉玛干沙漠保湿藻作为极端环境蓝藻，所分离得到的蓝藻作为极端环境蓝藻，在几十万年的进化中必然会积累出其它蓝藻所没有的独特的生理生化特性。塔克拉玛干沙漠保湿藻细胞持水性极强，具有分泌出丰富的多糖成分。但是目前没有一套成熟完善的进行分离培养保湿藻的工艺方法，传统的10倍稀释法的分离原理是分离后进行培养，但是此方法中，目的藻种在沙漠土样中的生物量很低，不能保证成功分离目的藻种以及保证目的藻种的生长，同时，目前还没报到有关保湿藻的规模化培养方法。

发明内容

鉴于现有技术中所存在的问题，本发明提供了一种具有沙漠土壤保湿功能的蓝藻培养方法，采用的技术方案是，包括以下步骤：

Step.1保湿藻的分离：称取沙漠土壤样品，按每100g至200g沙漠土壤样品中加入300ml至500ml的BG11液体培养基计，向沙漠土壤样品中加入BG11液体培养基，在转速为80rpm至100rpm条件下用摇床5min至10min，使样品与培养基充分混匀，将混合物在温度为27℃至30℃、光照为3000Lux至3500Lux条件下静止培养7天至21天，等培养物上清液变绿后，按每300μL至500μL上清液涂布在25ml至30ml TAP固体培养基上计，在无菌条件下吸取上清液，涂布在含有BG11固体培养基的培养皿中，并在温度为27℃至30℃、光照为3000Lux至3500Lux条件下培养7天至21天得到保湿藻培养物；

Step.2纯化：按每单个保湿藻藻丝接种在25ml至35ml的BG11固体培养基上计，用已灭过菌的接种环在保湿藻培养物种挑去单个保湿藻藻丝，划线法接种在含有BG11固体培养基的固体平板上，在温度27℃至30℃、光照为3000Lux至3500Lux条件下培养7天至21天得到一代保湿藻藻体，再用已灭过菌的接种环在一代保湿藻藻体中挑去单个保湿藻藻丝接种在含有新的BG11固体培养基的固体平板上，在温度为27℃至30℃、光照为3000Lux至3500Lux条件下培养7天至21天得到二代保湿藻藻体，重复直至接种5代至7代，最后得到纯保湿藻藻体；