[发明专利]一种对叶百部指纹图谱的构建方法及鉴定方法

权利要求书

1.一种对叶百部指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括下述步骤：

(1)参照物溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，加30％甲醇制成每1mL含绿原酸0.025mg的溶液，即得；

(2)供试品溶液的制备：取对叶百部样品，加水煎煮，保持微沸，同时浓缩体积至20～30mL，冷却至室温，滤过，用水饱和正丁醇振摇提取多次，合并提取液，蒸干，加30％甲醇适量使溶解，定量转移至5mL量瓶中，加30％甲醇定容，摇匀，即得；

(3)色谱条件：采用Halo ^R 5C18色谱柱，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

以乙腈为流动相A、0.4％磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；平衡时间10分钟；流速每分钟为1.0mL；检测波长为梯度波长；柱温35℃；理论板数按绿原酸峰计算应不低于50000；

(4)测定：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各5～20μL，注入液相色谱仪，记录4～30min的色谱峰，得到对叶百部指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，包括下述步骤：

(1)参照物溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，加30％甲醇制成每1mL含绿原酸0.025mg的溶液，即得；

(2)供试品溶液的制备：取1g对叶百部样品，加水煎煮，保持微沸，同时浓缩体积至20～30mL，冷却至室温，滤过，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次20mL，合并提取液，蒸干，加30％甲醇适量使溶解，定量转移至5mL量瓶中，加30％甲醇定容，摇匀，即得；

(3)色谱条件：采用Halo ^R 5 C18色谱柱，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

(4)测定：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，记录4～30min的色谱峰，得到对叶百部指纹图谱。

3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中用滤纸滤过。

4.一种对叶百部的鉴定方法，其特征在于，以待测样品为供试品，采用权利要求1～3任一项所述构建方法的步骤(1)～步骤(4)得到待测样品的指纹图谱，利用中药色谱指纹图谱相似度评价软件将所述待测样品的指纹图谱与对叶百部标准指纹图谱进行分析，相似度大于等于0.907鉴定为对叶百部。