[发明专利]介导外源蛋白内吞的多肽和核酸及其应用和在异足新米虾中进行基因编辑的方法有效
| 申请号： | 201911283525.X | 申请日： | 2019-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN112979778B | 公开（公告）日： | 2022-04-22 |
| 发明（设计）人： | 李冉;王鑫;孙金生 | 申请（专利权）人： | 天津师范大学 |
| 主分类号： | C07K14/435 | 分类号： | C07K14/435;C12N15/12;C12N15/90;C12N9/22;A01K67/033 |
| 代理公司： | 天津创智天诚知识产权代理事务所(普通合伙) 12214 | 代理人： | 王秀奎 |
| 地址： | 300387 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 介导外源 蛋白 多肽 核酸 及其 应用 异足新 米虾 进行 基因 编辑 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种多肽，该多肽能够介导外源蛋白的内吞，其特征在于：该多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种核酸，其特征在于：该核酸编码权利要求1所述的多肽。
3.如权利要求2所述的核酸，其特征在于：该核酸的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.一种如权利要求1所述的多肽或权利要求2或3所述的核酸在介导外源蛋白内吞中的应用，其特征在于：所述外源蛋白为Cas9，所述内吞发生在异足新米虾卵母细胞中。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：将融合核酸构建进表达质粒，并导入至工程菌，通过工程菌表达收集目标蛋白，将目标蛋白通过显微注射仪注射入卵黄发生前期的米虾心腔附近；所述融合核酸含有融合在同一核酸链中的编码Cas9蛋白的核酸和权利要求2或3所述的核酸。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于：所述融合核酸的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
7.一种在异足新米虾中进行基因编辑的方法，其特征在于，该方法包括：将sgRNA和融合蛋白混合以形成RNP复合物，并且将RNP复合物通过显微注射仪注射入卵黄发生前期的米虾心腔附近；所述融合蛋白含有融合在同一肽链中的Cas9多肽和权利要求1所述的多肽。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，该方法还包括：向卵黄发生前期的米虾中导入外源基因模版。
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