[发明专利]一种多肽/基因共递送材料、制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种多肽/基因共递送材料的制备方法，包括以下步骤：步骤1，将多肽在PBS缓冲液中均匀分散得到第一溶液；步骤2，向所述第一溶液中通入CO₂气体反应，得到第三溶液；步骤3，将所述第三溶液与pZNF580基因的水溶液混合得到第四溶液，所述第四溶液中所述多肽与所述pZNF580基因的质量比为(0.2～50):1；将所述第四溶液涡旋、静置，得到所述多肽/基因共递送材料。本发明制备的多肽/基因共递送材料不仅可用于高效递送目的基因，解锁基因的生物学功能，实现驱动血管生成。更重要的是，基因的级联表达则会进一步解锁多肽在内皮细胞中的生物活性，胞内原位催化合成一氧化氮气体，实现调节炎症的功能。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种多肽/基因共递送材料、制备方法及应用。

背景技术

炎症环境极易造成血管内皮细胞的损伤，进而引发或者加剧心血管疾病。然而，现有的生物材料仅具有促血管化或调节炎症中的一种功能，这不利于在发病前期及时修复受损血管以及组织器官。在小鼠急性下肢缺血的治疗中，递送血管内皮生长因子基因至缺血部位可以高效地促进微血管的生成，恢复血流。但是，这种治疗效果通常具有较短的时效性，主要是由于受损部位的炎性程度并未下调，仍然会刺激血管，再次引发血管损伤和缺血性疾病。同时，另外一种比较有效的治疗策略是进行抗炎分子的药物递送，以下调或者消除缺血部位的炎症环境，但是这种策略也面临着血管生成速率过慢的问题，易造成组织或者器官不可逆的损伤。因此，在炎性血管类疾病的治疗中，亟需一种兼具促血管生成和调节炎症功能的递送材料。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种具有时序性互相解锁功能的多肽/基因共递送材料、制备方法及应用，以实现促血管化同时下调炎症，为多肽/基因共递送材料的设计提供了新思路。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种多肽/基因共递送材料的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，将多肽在PBS缓冲液中均匀分散得到第一溶液，所述第一溶液中所述多肽的质量浓度为0.2～100mg/ml；所述PBS缓冲液的pH范围为7.2～9.0，所述多肽为K(L-Arg)₈H₁₂(L-Arg)₈K或K(D-Arg)₈H₁₂(D-Arg)₈K；

步骤2，将所述第一溶液与pZNF580基因的水溶液混合得到第二溶液，所述第二溶液中所述多肽与所述pZNF580基因的质量比为(0.2～50):1；将所述第二溶液涡旋、静置，得到所述多肽/基因共递送材料。

上述技术方案中，所述PBS缓冲液的pH范围为7.2～7.4。

上述技术方案中，所述第二溶液中所述多肽的质量浓度为0.5～100mg/ml。

上述技术方案中，pZNF580基因的水溶液的浓度为10～500μg/mL。

上述技术方案中，所述静置过程为在20～25℃下静置10～120min。

一种多肽/基因共递送材料的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，将多肽在PBS缓冲液中均匀分散得到第一溶液，所述第一溶液中所述多肽的质量浓度为0.2～100mg/ml；所述PBS缓冲液的pH范围为7.2～9.5，所述多肽为K(L-Arg)₈H₁₂(L-Arg)₈K或K(D-Arg)₈H₁₂(D-Arg)₈K；

步骤2，向所述第一溶液中通入CO₂气体反应，得到第三溶液；