[发明专利]一种基于均相化学发光免疫竞争法检测犬C-反应蛋白的试剂盒

说明书

本发明公开了一种基于均相化学发光免疫竞争法检测犬C‑反应蛋白的试剂盒，其中，所述试剂盒包括DNA1‑cCRP抗原偶联物、DNA2‑cCRP抗体偶联物、标记吖啶酯(AE)的DNA3和氧化石墨烯(GO)结合抗氧化剂(AOD)。利用本发明的试剂盒进行检测，其操作简单、结果准确、耗时短、精密度高，并且能够定量检测；样本无需稀释，不存在HOOK效应。

技术领域

本发明涉及化学发光免疫分析法技术领域，特别是涉及一种基于均相化学发光免疫竞争法检测犬C-反应蛋白的试剂盒。

背景技术

近年来由于人CRP对于临床疾病诊断、病程的检测和预后具有非常重要的作用，CRP的研究已经成为当下人类临床医学研究的热点。尽管在人类医学中CRP的应用已经非常广泛和深入，其检测技术也非常成熟，但CRP并没有广泛运用到兽医临床的常规检测中，对疾病时CRP浓度变化的研究也只是停留在实验室研究阶段。在国外，早在上世纪七十年代就已经开展了犬临床CRP的研究，在国内却少有文献记载。

据文献记载，和人CRP—样，犬CRP是犬血清中一种急性时相蛋白。正常犬血清CRP含量很少，一般都低于5mg/L，机体的炎症反应和病变时，巨唾细胞分泌的炎性细胞因子，白细胞介素6和肿瘤坏死因子会使血清CRP的含量升高一百多倍。犬发生炎症、感染和组织损伤时CRP浓度都会升高，例如钩端螺旋体病，巴贝斯虫病，细小病毒感染，手术创伤，淋巴瘤和血管肉瘤这些恶性肿瘤，子宫蓄脓，急性胰腺炎，免疫介导的溶血性贫血，关节炎，肾小球肾炎，实验性炎症。由于犬的CRP有急性期的蛋白的性质，所以它不仅仅提供一个鉴别诊断的辅助方法，它还是临床兽医学中的炎症标志，同时也是研究人急性期蛋白质时人CRP的试验模型。因此对犬CRP的研究具有重要的意义。

国内外许多实验室已经研发出许多犬CRP的检测方法，例如免疫比浊法，酶联免疫吸附实验法，胶体金免疫层析法，荧光免疫层析法，以及日本研发的一种犬专用的激光比浊免疫分析法(LNIA)等等。免疫比浊法受干扰因素影响较大；ELISA由于其检测方法耗时耗力，所以该方法只适合实验室研究，不适合用于临床诊断；胶体金和荧光免疫层析法属于定性和半定量检测，结果准确度不高。迫切需要精准、快速和定量的犬CRP检测产品，化学发光法是最好的选择，尤其是均相化学发光法。

由此可见，上述现有的犬C-反应蛋白（cCRP）在检测方法与使用上，显然仍存在有不便与缺陷，而亟待加以进一步改进。为了解决犬CRP的检测方法中存在的问题，相关厂商莫不费尽心思来谋求解决之道，但长久以来一直未见适用的设计被发展完成，而一般方又没有适切的方法能够解决上述问题，此显然是相关业者急欲解决的问题。

有鉴于上述现有的犬CRP的检测方法中存在的缺陷，本发明人基于从事此类产品设计制造多年丰富的实务经验及专业知识，并配合学理的运用，积极加以研究创新，以期创设一种新的基于均相化学发光免疫竞争法检测犬C-反应蛋白的试剂盒，能够改进一般现有的检测方法，使其更具有实用性。经过不断的研究、设计，并经反复试作及改进后，终于创设出确具实用价值的本发明。

发明内容

本发明的主要目的在于，克服现有的检测方法中存在的缺陷，而提供一种新的基于均相化学发光免疫竞争法检测犬C-反应蛋白的试剂盒，所要解决的技术问题是使其检测结果精准、快速并且能够定量，从而更加适于实用，且具有产业上的利用价值。

本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

依据本发明提出的一种基于均相化学发光免疫竞争法检测犬C-反应蛋白的试剂盒，其中，所述试剂盒包括DNA1-cCRP抗原偶联物、DNA2-cCRP抗体偶联物、标记吖啶酯（AE）的DNA3和氧化石墨烯（GO）结合抗氧化剂（AOD）。