[发明专利]一种应用于养猪发酵床的菌种筛选方法和应用

说明书

一种本发明的应用于养猪发酵床的菌种筛选方法(1)采集猪粪尿样品；(2)模拟发酵床培养；(3)初筛；(4)复筛，得到优良菌种。本发明从猪粪尿样品中筛选出对猪粪具有较好降解效果的菌株，分别经扩大培养后，组成混合菌液，可直接应用于养猪发酵床；本发明提供的菌株筛选方法可以适用不同地区的生态环境，可以为当地的发酵床养猪技术提供菌种来源，不会受外来菌种的影响，也不会破坏当地的微生态平衡。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，尤其涉及一种应用于养猪发酵床的菌种筛选方法和应用。

背景技术

随着生猪养殖业规模化、集约化、商业化模式的发展，猪粪尿引发的环境污染问题越来越严重，成为当前农村生猪养殖场急需解决的问题。随着“水十条”的出台，对农村畜禽养殖污染防治等均以明确的量化指标进行了详细的要求，这标志着我国以环境质量和环境效果为核心的环保新时代即将到来。

发酵床养猪技术是为了实现猪粪尿原位降解的新型养殖技术，其技术原理是在锯末、稻壳等垫料中加入有益微生物菌群作为生物发酵床，猪只饲养在发酵床上，其排泄的粪尿与垫料在猪只的翻拱和人工辅助翻耙下充分混合，通过微生物的作用，使粪尿分解，基本达到无污染、近零排放、良性循环的新型环保养猪技术。

发酵床养猪技术的核心是微生物菌剂，其中，优势菌群起着关键作用，对发酵温度、畜禽粪尿降解、病原菌的抑制等具有重要影响，因此发酵床中优势菌的选育具有重要的意义。发酵床的发酵过程包含升温、高温和降温3个阶段，相关的功能微生物也在不同阶段发挥了对有机物的分解作用。因此，发酵床的优势菌株必须能耐受一定的高温，才能完成其对有机物的分解作用。目前市售的发酵床菌种主要由芽孢杆菌、不动杆菌属、放线菌属、酵母菌和乳酸菌属等组成，且由于市售的菌剂品质不一，而且对于特定的地域而言，这些菌剂相当于是外来菌株，一旦菌剂流失，容易破坏当地的微生态平衡。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一种应用于养猪发酵床的菌种筛选方法。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为：

一种应用于养猪发酵床的菌种筛选方法，包括以下步骤：

(1)采集猪粪尿样品；

(2)模拟发酵床培养：

S1：将采集的0.1-0.5份猪粪尿样品与0.1-0.5份灭菌麦麸混合，搅拌均匀；

S2：将2-4份灭菌锯末与2-4份无菌稻壳进行混合，再添加0.2-0.5份无菌红糖水，搅拌均匀，同时加入无菌水，使混合样含水量达40-55％；

S3：将S1得到的物料与S2得到的物料混合，并搅拌均匀，恒温培养10-60d；

(3)初筛；

(4)复筛，得到优良菌种。

上述的菌种筛选方法，优选的，所述初筛的具体操作步骤包括：

(a)称取2份模拟发酵床培养的样品，放入装有菌水并加有小玻璃珠的锥形瓶中，置于摇床震荡20-30min；

(b)移取步骤(a)得到的2份样品分别置于2种不同富集培养基中，恒温培养5-7d，得到样品A和样品B；

(c)将样品A分成两等份A1和A2，样品B分成两等份B1和B2，将A1和A2分别置于2种不同的富集培养基中培养，B1和B2分别置于2种不同的富集培养基中，恒温培养5-7d，得到样品C1、C2、C3和C4；

(d)将样品C1等分成10份：C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17、C18、C19和C10，

将样品C2等分成10份：C21、C22、C23、C24、C25、C26、C27、C28、C29和C20，