[发明专利]交联人源干细胞因子的胶原蛋白、及其制备方法、在美容和皮肤修复领域的应用

说明书

本发明公开了交联人源干细胞因子的胶原蛋白，包括利用具有胶原蛋白亲和性的人源细胞因子与胶原蛋白利用交联剂交联固化得到的胶原蛋白。本发明同时公开了交联人源干细胞因子的胶原蛋白的制备方法和在美容、皮肤修复领域的应用。本发明可促进伤口愈合、改善皮肤质量和皮肤松弛、减少皮肤皱纹和条纹、改善皮肤紧致性、美白肌肤、减少皮肤暗沉和皮肤斑点、祛痘。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及交联人源干细胞因子的胶原蛋白、制备方法及其应用。

背景技术

干细胞是一种未分化完全的细胞，具有自我复制，以及分化成多种功能细胞的能力。干细胞因子是干细胞生存微环境中一群重要组成成分，在干细胞治愈人体免疫性疾病治疗，组织创伤修复以及抗衰老过程中被证明起到了重要的作用。不同来源干细胞可分泌不同类群干细胞因子，同种干细胞在不同培养体系中分泌的干细胞因子数量也会不同，如果使用脐带来源间充质干细胞体外培养可获得大量免疫原性低的干细胞因子。干细胞及干细胞因子在许多疾病治疗中证明了其有效性，但依然遇到了许多的临床应用问题，其中很重要的一项便是如何保证干细胞及其分泌的细胞因子在疾病发生部位起作用，而不会在正常部位或非治疗需求部位浪费，影响最终的治疗结果。

因此，开发一种交联人源干细胞因子的胶原蛋白、制备方法及其应用，实现低排异或无排异人源干细胞因子与胶原蛋白材料的规模化生产，不但具有迫切的研究价值，也具有良好的经济效益和大规模医疗应用潜力，这正是本发明得以完成的动力所在和基础。

发明内容

为了克服上述所指出的现有技术的缺陷，本发明人对此进行了深入研究，在付出了大量创造性劳动后，从而完成了本发明。

具体而言，本发明所要解决的技术问题是：提供交联人源干细胞因子的胶原蛋白、制备方法及其应用，使胶原蛋白具有无免疫排斥或低免疫排斥，修复皮肤创伤等特点。

第一方面，本发明提供了交联人源干细胞因子的胶原蛋白，包括利用具有胶原蛋白亲和性的人源细胞因子与胶原蛋白利用交联剂交联固化得到的胶原蛋白。

本发明中，作为一种优选的技术方案，所述交联人源干细胞因子的胶原蛋白中，人源细胞因子的含量5-15wt％，胶原蛋白的含量为80-150IU/ml。

本发明中，作为一种优选的技术方案，所述具有胶原蛋白亲和性的人源细胞因子从脐带间充质干细胞培养过程获得的人源细胞中提取得到。

本发明中，作为一种优选的技术方案，所述具有胶原蛋白亲和性的人源细胞因子需要用ELISA试剂盒确定因子浓度。

本发明中，作为一种优选的技术方案，所述胶原蛋白包括多种种类的胶原蛋白，优选I-型胶原蛋白。

本发明中，作为一种优选的技术方案，所述交联剂采用2.5wt％的戊二醛。

第二方面，本发明提供了交联人源干细胞因子的胶原蛋白的制备方法包括：

S1、接种、培养脐带间充质干细胞，并收集上清液；

S2、过滤、浓缩上清液，得到干细胞因子，并用ELISA试剂盒确定因子浓度；

S3、将干细胞因子与胶原蛋白进行交联固化。

本发明中，作为一种优选的技术方案，所述步骤S1中，第一步：使用I型胶原蛋白进行包被培养瓶，常温放置2h或4℃过夜；第二步：将干细胞按1-3×10⁴/cm²密度进行接种；第三步：细胞生长融合度在85-90％的时候，收集上清液。

在第一步中，生产不同亲和型胶原蛋白可使用不同胶原蛋白进行包被。