[发明专利]一种胎源性成年癫痫动物模型的构建方法及其用途

说明书

本发明提供一种胎源性成年癫痫动物模型的构建方法及其用途，所述的胎源性成年癫痫动物模型为正常受孕的啮齿类动物于孕9～20天每日给予0.2mg/kg地塞米松皮下注射，F1子代仔鼠出生后常规正常饲养至12周以氯化锂‑匹罗卡品腹腔注射诱导癫痫发作，经癫痫相关指标检测提示癫痫易感性，进一步于18周龄检测行为学相关指征提示焦虑、抑郁及认知障碍，判定得到所述胎源性成年癫痫动物模型。本发明所建立的模型新颖、可靠、简便，对研究胎源性成年癫痫的发生机制，确定临床早期预警及药物防治靶标方面具有重要意义。

技术领域

本发明涉及动物模型构建技术领域，具体涉及一种胎源性成年癫痫动物模型的构建方法及其用途。

背景技术

癫痫是大脑神经元细胞群过度放电引起的阵发性脑功能障碍，是以反复痫样发作为特征的神经系统慢性疾病。流行病学调查发现，世界范围内癫痫的发病率约为0.5～1.5％，发病人数约为5000万人，婴幼年期、青春期和成年早期均为癫痫发病高峰期。我国癫痫发病率约为0.6％，尤以10～19岁男性居多。Olli Nevalainen通过对3,558例确诊癫痫患者死亡原因分析，发现脑癌(17％)、其他癌症(15％)、缺血性心脏病(11％)、脑血管疾病(10％)以及自杀(1.6％)均为癫痫患者致死原因。此外，癫痫患者通常伴有认知功能障碍、抑郁、焦虑、睡眠障碍等不同类型的并发症，且在没有已知的可导致死亡的病因下会发生不可预测性突然死亡。在神经系统疾病死因统计中，癫痫患者死亡率比普通人群要高3倍，仅次于脑血管病。由此可见，癫痫不仅严重影响了患者的生活质量，也给家庭及社会带来巨大的负担和压力，已成为迫切需要解决的公共卫生问题。

目前部分患者使用现有的抗癫痫药物能有效控制发作，但仍有20～30％的癫痫患者治疗效果差，不能有效控制发作，称为药物难治性癫痫。颞叶癫痫(temporal lobeepilepsy,TLE)作为最常见的药物难治性癫痫，虽然大多到青春期或成年期才出现癫痫发作，但其发病机制被认为始于生命早期，存在发育起源。流行病学研究提示，孕期各种不良因素导致的胎儿宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)，与出生后早期热性惊厥风险增加相关，且部分导致儿童期或成年期癫痫发作。以上提示，癫痫存在宫内起源，为胎源性成年癫痫。由于胎源性成年癫痫发作机制的复杂性以及不确定性，需要使用一种胎源性成年癫痫的动物模型来复制这种神经系统疾病中遇到的组织病理学，脑电图和行为学特征。胎源性成年癫痫模型的建立对于深入研究胎源性成年癫痫的发病机制以及探讨早期预警及药物防治靶标都具有十分重要的意义。

癫痫的动物模型是指某特定物种具有外界诱发或遗传的癫痫发作倾向。因此，为了检测癫痫持续发作状态时脑电图的变化以及行为学特征，大量癫痫模型研究中使用诱导因素使其保持癫痫的持续发作。如腹腔给予匹罗卡品或者戊四氮构建TLE动物模型；侧脑室注射海人酸建立TLE动物模型等。在给予诱导因素后，动物保持癫痫持续发作的状态，有利于我们监测脑电波以及探究癫痫发作区域。现有的TLE动物模型均为出生后期给予不同的诱导因素处理。这些造模方法虽能模拟癫痫发生的疾病表型，但给药的时间为出生后而非孕期，因而只能反映出生后的环境或药物造成的部分情绪异常，与胎源性成年癫痫发病机制方面存在较大的差异。因此，现有研究迫切需要建立与人类癫痫疾病高度相似的胎源性成年癫痫大鼠模型，探究其发病机制、早期预警及药物防治靶标，进一步造福人类。

合成糖皮质激素(synthetic glucocorticoid,sGC)如地塞米松，由于其容易透过胎盘的特性，临床上广泛用于有早产倾向孕妇的预防性治疗。然而，流行病学调查发现，孕期应用地塞米松可致胎儿IUGR。临床和动物实验证据表明，药物、环境毒物暴露、围产期脑损伤或长时间的热性惊厥均可损伤海马，可能是癫痫发生的始动因素。我们的前期研究发现，孕期地塞米松暴露可损伤胎鼠海马发育。

发明内容

本发明目的之一在于提供一种胎源性成年癫痫动物模型的构建方法，所述方法简单，较好的模拟了胎源性成年癫痫的发作。