[发明专利]一种胎源性成年癫痫动物模型的构建方法及其用途有效
| 申请号: | 201911241461.7 | 申请日: | 2019-12-06 |
| 公开(公告)号: | CN110973061B | 公开(公告)日: | 2021-08-03 |
| 发明(设计)人: | 徐丹;汪晖;焦哲潇;宜怡雯;戴诗韵 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
| 主分类号: | A01K67/027 | 分类号: | A01K67/027 |
| 代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 艾小倩 |
| 地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 胎源性 成年 癫痫 动物 模型 构建 方法 及其 用途 | ||
1.一种胎源性成年癫痫动物模型的构建方法,其特征在于:包含以下步骤:
步骤1:取正常受孕的啮齿类动物,在孕9-20天期间给予0.2mg/kg.d地塞米松皮下注射,该过程中孕鼠自由饮水和饮食;
步骤2:上述步骤1的给予地塞米松后的孕鼠自然生产F1子代仔鼠,选取窝仔数8~14只的窝仔,调整每窝雄、雌性仔鼠各4只进行哺乳喂养,4周后断奶,断奶后雄、雌分笼继续正常饮食饲养;
步骤3:取上述步骤2的正常饮食至12周龄的F1子代仔鼠,按照体重以127mg/kg剂量腹腔注射氯化锂,16~24小时后按照体重以30mg/kg腹腔注射匹罗卡品诱导癫痫发作,经癫痫相关指标检测提示癫痫易感性,进一步于18周龄检测行为学相关指征提示焦虑、抑郁及认知障碍,判定得到所述胎源性成年癫痫动物模型;
所述步骤3中,癫痫相关指标检测采用以下方法:取所述步骤2的正常饮食至11周龄的F1子代仔鼠,植入电极,1周后将大鼠称重并按照127mg/kg剂量腹腔注射氯化锂,16~24小时后按照30mg/kg剂量腹腔注射匹罗卡品诱导癫痫发作,记录90分钟的脑电图、并拍摄癫痫行为学视频以检测癫痫相关指标;所述癫痫相关指标为癫痫发作等级、首次癫痫发作时间、癫痫活化百分比、代表性癫痫样活动痕迹;
所述步骤3中,行为学相关指征检测采用以下方法:
在所述步骤3中按照127mg/kg剂量腹腔注射氯化锂、16~24小时后按照体重以30mg/kg腹腔注射匹罗卡品诱导癫痫发作之后,于癫痫发作90分钟后按照体重以350mg/kg经腹腔注射10%水合氯醛终止癫痫发作,于癫痫发作6周后分别检测行为学相关指征;
所述行为学相关指征为旷场实验、十字高架迷宫、新事物/位置认知、Morris水迷宫;
所述步骤1中,所述啮齿类动物为SPF级Wistar、SD大鼠或昆明种小鼠。
2.一种如权利要求1所述的胎源性成年癫痫动物模型的构建方法构建的胎源性成年癫痫动物模型在研究胎源性癫痫的发生机制、确定癫痫临床早期预警及干预靶标中的应用。
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