[发明专利]一种治疗非酒精脂肪肝的毛叶山桐子提取物及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种治疗非酒精脂肪肝的毛叶山桐子提取物，它是毛叶山桐子果实的乙酸乙酯萃取相，经高速逆流色谱分离得到的提取物；所述乙酸乙酯萃取相是毛叶山桐子果实的醇提液，干燥后加水溶解，再用乙酸乙酯萃取后的乙酸乙酯部位；所述高速逆流色谱的溶剂体系是由正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水组成；所述溶剂体系萃取后的上层为流动相，下层为固定相。本发明毛叶山桐子提取物，对缓解非酒精性脂肪肝具有显著效果，能使细胞内甘油三酯(TG)显著降低，脂肪合成、炎症相关代谢通路的基因水平下调，脂肪分解代谢等相关代谢通路的基因水平上调，具备推广应用价值。

技术领域

本发明属于生物药物的开发与应用领域，具体为一种治疗非酒精脂肪肝的毛叶山桐子提取物及其制备方法和用途。

背景技术

非酒精性脂肪肝（NAFLD）是一种无过量饮酒史，以肝细胞脂肪变性和脂质贮积为特征的临床病理综合征。其病理变化随病程的进展而表现有单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化和肝硬化。NAFLD的常见病因有肥胖、II型糖尿病、高脂血症、高血压等。近年来随着生活水平的提高，NAFLD的发病率明显增加，且趋于年轻化。虽然目前对于NAFLD的致病机理进行了较多的研究，但其确切机理仍不明确。而目前市场上用于缓解NAFLD的药物（罗格列酮、奥贝胆酸、盐酸二甲双胍和他丁类药物）由于效果不佳且副作用较大，因此美国食品药品监督管理局（FAD）和美国肝病研究学会（AASLD）没有批准任何一种针对非酒精性脂肪肝的特效药。故开发新的药物以及验证药物的代谢通路是未来治疗非酒精性脂肪肝的一个重要研究方向。

毛叶山桐子（Idesia polycarpa Maxim. var. vestita Diels）是大风子科山桐子属落叶乔木，该属在全球仅有1种，在我国分布于秦岭淮河以南及台湾地区，国外主要分布在日本、朝鲜半岛及俄罗斯远东地区。研究发现毛叶山桐子果实富含具有广谱生物活性的酚苷类成分，该类成分具有抗炎、抗菌的活性，在化妆品和医药等领域具有潜在的开发和应用价值。然而，由于山桐子果实成分复杂，对其中成分的分离存在一定难度，因此，针对其特定成分的作用研究受到了限制。

目前还没有关于毛叶山桐子具有治疗非酒精性脂肪肝的报道。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种治疗非酒精脂肪肝的毛叶山桐子提取物，它是毛叶山桐子果实的乙酸乙酯萃取相，经高速逆流色谱分离得到的提取物；

所述乙酸乙酯萃取相是毛叶山桐子果实的醇提液干燥后加水溶解，再加乙酸乙酯萃取，上层萃取液除去溶剂后得到的乙酸乙酯部位；

所述高速逆流色谱的溶剂体系是由正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水组成；所述溶剂体系萃取后的上层为固定相，下层为流动相。

进一步地，它是将毛叶山桐子果实的乙酸乙酯萃取相溶解在体积比1：1的高速逆流色谱流动相和固定相组成的混合溶液中，再经高速逆流色谱分离，收集得到的57.5—62.5 min和77.5—82.5 min两个时间段的提取物。

进一步地，所述正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为3~4 : 1~2 : 1~1 : 5。

更进一步地，所述正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为4:1:1:5或3:2:1:5。

进一步地，所述高速逆流色谱的色谱条件为转速为800rpm，流速为5 mL/min，波长为312 nm。

本发明还提供了一种前述毛叶山桐子果实的乙酸乙酯萃取相的制备方法，它包括如下步骤：

1）取毛叶山桐子果实，干燥粉碎，过筛，加正己烷脱脂，得脱脂果渣；

2）取步骤1)脱脂果渣，加乙醇拌均，浸渍5-8h，过滤，取滤液干燥，干燥物加水溶解，再加乙酸乙酯萃取，取上层液体除去溶剂即得。