[发明专利]抗人巨细胞病毒抗体及其用途

说明书

本发明涉及对人巨细胞病毒具有特异性并以高亲和力结合的单克隆抗体或其抗原结合片段，以及产生这种抗体的制备方法。发明的抗体还具有中和感染的高效力。本发明还涉及所述抗体所结合的表位，以及所述抗体在感染个体中诊断、预防以及治疗的应用。

本发明涉及对人巨细胞病毒具有特异性并以高亲和力结合的抗体或其抗原结合片段，以及产生这种抗体的制备方法。发明的抗体还具有中和感染的高效力。本发明还涉及所述抗体所结合的表位，以及所述抗体在感染个体中诊断、预防以及治疗的应用。

背景技术

人巨细胞病毒(human Cytomegalovirus，HCMV)广泛分布，在人群中的感染率为40％～100％，在免疫功能受损的人群，如器官移植受者、骨髓移植受者、HIV患者、孕妇以及胎儿中会引发严重的并发症甚至死亡，并参与恶性肿瘤及慢性疾病。在美国和欧洲，活产儿感染HCMV的概率估计为0.2％-1.2％；中国国内育龄女性感染率高达95.3％，孕妇原发感染引起的宫内感染率约为30.0％-40.0％。HCMV的血清阳性在发展中国家或低收入区域中更加普遍。

原发感染HCMV后，病毒可以在宿主体内潜伏、复制和传播，能够避开宿主的免疫系统，极少能够达到清除全部的HCMV。通常，大多数人感染HCMV是无症状的。在患病和免疫功能受损(例如移植受者、HIV患者等)的情况，原发性感染或HCMV再活化后可导致泌尿系统、中枢神经系统、肝脏、肺、血液循环系统等病变；HCMV还会继发免疫抑制，增加感染的几率，导致发病和死亡。此外，HCMV是出生缺陷(包括器官缺陷、发育迟缓、智力迟钝和视听觉丧失)的主要感染原因，这是通过孕妇垂直传播造成的。而目前并没有预防或治疗胎儿感染的疗法。用于预防HCMV感染和相关疾病的Prevymis(MSD)是美国FDA近15年来批准的第一款HCMV感染新药，仅适用于成年患者。Cytogam和Cytotect是两款已经上市的巨细胞病毒免疫球蛋白制剂，但在临床上表现出明显的副作用和治疗效果的不确定性。

由于抗体在免疫防御中极其重要的作用，尤其是抗体在抗感染方面不可或缺，尽管抗人巨细胞病毒的单克隆抗体经历了多次失败，人门仍有理由选择其进一步研究。按照目前抗体技术的发展，更有可能具有更有效的是从人B细胞获得的高中和能力的单克隆抗体。

本发明披露的抗体来源于人B细胞，弥补了现有技术的不足，本发明的目的在于提供特异性强、中和效价高的全人源单克隆抗体，适用于HCMV感染的医学治疗、预防和/或诊断中，还可用于治疗各种与HCMV感染相关的紊乱。

发明内容

本发明因此提供了一种新的结合人巨细胞病毒的抗体，以及其抗原结合片段，以及所述抗体结合的新抗原表位。

一方面，本发明提供了特异性强的以高效价中和人巨细胞病毒感染的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与人巨细胞病毒的包膜糖蛋白gB结合。

在本发明的实施方案中，本发明包括一种抗体，或其抗原结合片段，其能够与人巨细胞病毒gB糖蛋白融合结构域特异性结合。

本发明的一些实施方案中，本发明包括一种抗体，或其抗原结合片段，其结合gB糖蛋白融合结构域上包含一个或多个选自gB糖蛋白融合结构域的N208、L213和Y226组成的组的氨基酸残基的表位。在一些实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段结合gB糖蛋白融合结构域上包含gB糖蛋白融合结构域的氨基酸残基L213和Y226的表位。在一些实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段结合gB糖蛋白融合结构域上包含gB糖蛋白融合结构域的氨基酸残基N208的表位。

在另一个方面，本发明提供了特异性强的以高效价中和HCMV感染的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，本发明的抗人巨细胞病毒抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(VH)所含的三个互补决定区CDR中的至少一个、至少两个或全部三个。

在一些实施方案中，本发明的抗人巨细胞病毒抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区(VH)所含的三个互补决定区CDR中的至少一个、至少两个或全部三个。