[发明专利]老年性痴呆小鼠模型的制备方法

说明书

本发明公开了一种老年性痴呆小鼠模型的制备方法；本发明注射AD P‑tau后10个月的C57BL/6小鼠，可以检测出小鼠大脑的不同区域有tau病理性的改变，可成为靶标是tau的AD模型，亦可用于对AD疾病的分子机制的研究。通过该动物模型的建立，研究AD发病的分子机制，tau蛋白的病理发展过程以及传播特征；也可以使用该动物模型来研究某些因素，例如创伤性脑损伤、过表达或沉默磷酸酯酶来研究对tau病理发生发展的影响；更有意义的是，可以通过该模型的建立，有助于筛选出可以抑制或逆转tau病理发生发展及传播的药物。

技术领域

本发明属于动物模型技术领域，特别涉及一种老年性痴呆小鼠模型的制备方法。

背景技术

AD是多因素相关的疾病，老化是其最主要的病因。AD拥有病理特征：细胞外β-淀粉样蛋白（β-amyloid protein, Aβ）聚集形成的老年斑（senile plaque, SP）的沉积和细胞内大量的tau蛋白聚集形成神经原纤维缠结（neurofibrillary tangles, NFTs）和广泛神经元退变。一直以来在AD研究领域都是以Aβ为中心，以Aβ为靶标作为药物开发的重点。遗憾的是AD一直是新药研发的重灾区，该领域临床试验失败率高达99.6%，过去20年来在该领域的研究几乎全军覆没，所以寻找新的靶点非常必要。

越来越多的研究提示，人脑中tau病理传播是导致AD病程进展的关键原因之一，抑制 tau 病理可能对延缓或阻止AD病理传播起到积极作用(Iqbal et al., 2018)。因此，研究tau病理发生、发展的分子机制、开发以tau为靶标的AD药物，是当今AD领域的研究热点。现有技术从 AD 患者脑中提取的异常过度磷酸化 tau或体外表达重组 tau 蛋白经肝素诱导形成的聚集物，注射到小鼠脑海马区，诱发小鼠tau 蛋白发生类AD样tau病理, 并向相关脑区传播，可作为AD的疾病模型小鼠，用于AD相关致病机制研究，药物开发和筛选等(Clavaguera et al., 2009 Clavaguera, F., Bolmont, T., Crowther, R.A.,Abramowski, D., Frank, S., Probst, A., Fraser, G., Stalder, A.K., Beibel, M.,Staufenbiel, M., Jucker, M., Goedert, M., Tolnay, M., 2009. Transmission andspreading of tauopathy in transgenic mouse brain. Nat Cell Biol 11, 909-913.Hu, W., Zhang, X., Tung, Y.C., Xie, S., Liu, F., Iqbal, K., 2016.Hyperphosphorylation determines both the spread and the morphology of taupathology. Alzheimers Dement 12, 1066-1077。NFTs的聚集是AD另一病理特征，其数量和患者的痴呆程度呈明显的正相关，被认为是 AD 患者神经元纤维退化（neurofibrillarydegeneration)的病理基础。

研究的AD动物模型大致有以下几种: （1）损伤性动物模型, 包括前脑胆碱能系统损伤模型，冈田酸( OA )损害模型，铝损害模型，D-半乳糖损害模型，脑缺血痴呆动物模型，β淀粉样肽(Aβ)损害模型，秋水仙碱损伤模型等；（2）自然衰老认知障碍动物模型；（3）快速老化小鼠( SAM ) 模型；（4）复合型A D模型；（5）转基因动物模型。而目前通常使用转基因小鼠，但是从转基因小鼠的遗传背景、操作难易度及经济角度考虑，用于对AD分子机制的研究或治疗效果的判断有一定的限制。