[发明专利]用于治疗血液病症的富集和扩增的人脐带血干细胞

权利要求书

1.一种分离和扩增的人脐带血造血干细胞的富集群体，其中所述造血干细胞与细胞因子SCF、Flt3、TPO和IL3接触，其中所述造血干细胞与单一表观遗传调控子接触；其中所述单一表观遗传调控子是组蛋白脱乙酰酶抑制剂；其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂是丙戊酸(VPA)；其中所述干细胞是CD34+、CD90+、CD184+、CD117+、CD49f+、ALDH+和CD45RA-并表达多能性基因SOX2、OCT4、NANOG和ZIC3；且其中所述造血干细胞是冷冻保存的。

2.根据权利要求1所述的富集群体，其中至少60％的所述造血干细胞对于醛脱氢酶活性呈阳性。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的富集群体，其中所述造血干细胞不显示胚胎干细胞多能性基因hTERT的表达水平的上调。

4.根据权利要求1所述的富集群体，其中至少95％的所述造血干细胞对于SOX2、OCT4、NANOG和ZIC3呈阳性。

5.根据权利要求1所述的富集群体，其中所述造血干细胞相比于不与组蛋白脱乙酰酶抑制剂接触的分离和扩增的人脐带血干细胞具有降低的HDAC1、HDAC3和HDAC5表达。

6.根据前述权利要求1所述的富集群体，其中至少16.8％的所述造血干细胞处于G2/M期。

7.根据前述权利要求1所述的富集群体，其中至少9.4％的所述造血干细胞处于G0/G1期。

8.根据权利要求1所述的富集群体，其中所述造血干细胞不与DNA甲基转移酶抑制剂(DNMTI)接触。

9.一种产生分离和扩增的人脐带血造血干细胞的富集群体的方法，所述方法包括：

提供人脐带血造血干细胞的分离群体；

使所述造血干细胞与细胞因子SCF、Flt3、TPO和IL3接触，以激活所述造血干细胞；

在具有单一表观遗传调控子的不含血清的培养体系中处理所述人脐带血造血干细胞的分离和激活的群体，其中所述单一表观遗传调控子是组蛋白脱乙酰酶抑制剂，且其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂是丙戊酸(VPA)；

培养所述处理的群体以产生分离和扩增的人脐带血造血干细胞的富集群体，其中所述扩增的人脐带血造血干细胞是CD34+、CD90+、CD184+、CD117+、CD49f+、ALDH+和CD45RA-并表达多能性基因SOX2、OCT4、NANOG和ZIC3；且其中所述造血干细胞是冷冻保存的。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述人脐带血造血干细胞的分离群体在所述培养后扩增20,202倍。

11.根据权利要求9或权利要求10所述的方法，其中所述培养进行7天。

12.根据权利要求9所述的方法，其中至少82.4％的所述扩增的造血干细胞对于醛脱氢酶活性呈阳性。

13.根据权利要求9所述的方法，其中所述扩增的造血干细胞不显示胚胎干细胞多能性基因hTERT的表达水平的上调。

14.根据权利要求9所述的方法，其中至少95％的所述扩增的造血干细胞对于SOX2、OCT4、NANOG和ZIC3呈阳性。

15.根据权利要求9所述的方法，其中所述扩增的造血干细胞相比于在所述处理之前的所述分离干细胞具有降低的HDAC1、HDAC3和HDAC5表达。

16.根据权利要求9所述的方法，其中至少95％的所述扩增的造血干细胞对于SOX2、OCT4、NANOG和ZIC3呈阳性。