[发明专利]同时检测血液中氯米帕明和N-去甲氯米帕明含量的方法

说明书

本发明提供了同时检测血液中氯米帕明和N‑去甲氯米帕明含量的方法。配制至少三个含已知浓度的氯米帕明标准品和N‑去甲氯米帕明标准品的标准工作液；将标准工作液、内标工作液和空白血液样本混合，进行样本前处理得到标准溶液；利用高效液相色谱仪分别检测各个标准溶液，得到各个标准溶液的色谱图；根据各个标准溶液的色谱图，拟合得到标准曲线方程；将内标工作液和经处理待检测血液而得到的血液样本混合，进行同样的样本前处理得到待测样本；同样检测待测样本得到其色谱图；根据待测样本的色谱图和各个标准曲线方程，计算血液样本中氯米帕明和N‑去甲氯米帕明的含量。本方案能够同时检测血液中氯米帕明和N‑去甲氯米帕明的含量。

技术领域

本发明涉及临床化学技术领域，特别涉及同时检测血液中氯米帕明和N-去甲氯米帕明含量的方法。

背景技术

抑郁症又称抑郁障碍，以显著而持久的心境低落为主要临床特征，是心境障碍的主要类型。临床可见心境低落与其处境不相称，情绪的消沉可以从闷闷不乐到悲痛欲绝，自卑抑郁，甚至悲观厌世，可有自杀企图或行为；甚至发生木僵；部分病例有明显的焦虑和运动性激越；严重者可出现幻觉、妄想等精神病性症状。抑郁症每次发作持续至少2周以上，长者甚或数年，多数病例有反复发作的倾向，每次发作大多数可以缓解，部分可有残留症状或转为慢性。

氯米帕明是一种三环抗抑郁药物，主要用于治疗强迫症(OCD)，也常用于治疗强迫性神经症、恐怖性神经症。氯米帕明主要作用在于阻断中枢神经系统5-羟色胺的再摄取，其活性代谢产物去甲氯米帕明可阻断中枢神经系统去甲肾上腺素再摄取，从而发挥抗抑郁及抗焦虑作用，亦有镇静和抗胆碱能作用。

目前已有测定血液中氯米帕明含量的方法。由于其代谢物同样具有药理活性，同样会影响治疗效果，故检测其活性代谢物很有必要。因此，有必要提出能够同时检测血液中氯米帕明及其代谢物N-去甲氯米帕明含量的方法。

发明内容

本发明提供了同时检测血液中氯米帕明和N-去甲氯米帕明含量的方法，能够同时检测血液中氯米帕明和N-去甲氯米帕明的含量。

为了达到上述目的，本发明是通过如下技术方案实现的：

本发明提供了同时检测血液中氯米帕明和N-去甲氯米帕明含量的方法，包括：

配制至少三个标准工作液，其中，标准工作液中含有浓度已知的氯米帕明标准品和N-去甲氯米帕明标准品，不同标准工作液中同一标准品的浓度不同；

将一定量的标准工作液、内标工作液和空白血液样本混合，进行样本前处理，得到标准溶液，其中，内标工作液中含有浓度已知的内标物；

利用高效液相色谱仪，在一定检测条件下，分别检测至少三个标准溶液，得到各个标准溶液的色谱图；

根据各个标准溶液的色谱图，拟合得到氯米帕明的标准曲线方程和N-去甲氯米帕明的标准曲线方程；

将一定量的内标工作液和血液样本混合，进行同样的样本前处理，得到待测样本，其中，血液样本经处理待检测血液而得到；

利用高效液相色谱仪，在相同检测条件下检测待测样本，得到待测样本的色谱图；

根据待测样本的色谱图和拟合得到的各个标准曲线方程，计算血液样本中氯米帕明和N-去甲氯米帕明的含量。

优选地，所述进行样本前处理，包括下述A1至A5：

A1：将混合液涡旋混匀；

A2：加入甲醇，涡旋混匀；

A3：加入萃取剂，涡旋混匀，离心得到上清液；

A4：移取上清液于离心管中，在常温下用氮气吹干；

A5：向上清吹干的离心管中加入复溶液，涡旋混匀，离心得到上清液。