[发明专利]用于肺炎支原体的CRISPR检测引物组及其用途有效
| 申请号： | 201911192004.3 | 申请日： | 2019-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN110804669B | 公开（公告）日： | 2022-12-16 |
| 发明（设计）人： | 许腾;曾伟奇;杨敏玲;徐学中;陈文景;李永军;王小锐;苏杭 | 申请（专利权）人： | 广州微远医疗器械有限公司;广州微远基因科技有限公司;广州微远医学检验实验室有限公司;深圳微远医疗科技有限公司;微远（深圳）医学研究中心有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/35 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 李海恬 |
| 地址： | 510130 广东省广州市高新技术产业开发*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 肺炎 支原体 crispr 检测 引物 及其 用途 | ||
1.一种用于检测肺炎支原体的试剂盒，其特征在于，包括CRISPR检测引物组，Cas13a蛋白，信号报告探针和RNA聚合酶；
所述CRISPR检测引物组包括扩增引物对和crRNA；所述扩增引物对选自：SEQ ID NO.2-3所示序列的引物对1，所述crRNA选自：SEQ ID NO.12所示序列；所述扩增引物对的工作浓度为0.1~0.6μmol/L，所述crRNA的工作浓度为20~100 nmol/L。
2.权利要求1所述的用于肺炎支原体的试剂盒在制备肺炎支原体感染诊断产品中的应用。
3.一种非诊断治疗目的肺炎支原体检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
样本提取：取待测样本，提取其中DNA；
RPA扩增：以SEQ ID NO.2-3所示序列的扩增引物，通过RPA方法扩增上述提取得到的待测样本DNA，得扩增产物；
CRISPR反应检测：取上述扩增产物，加入信号报告探针、Cas13a蛋白、RNA聚合酶和SEQID NO.12所示序列的crRNA，进行CRISPR反应检测，读取检测信号，即得。
4.根据权利要求3所述的肺炎支原体检测方法，其特征在于，所述Cas13a蛋白为LwCas13a蛋白。
5.根据权利要求3所述的肺炎支原体检测方法，其特征在于，所述RNA聚合酶为T7 RNA聚合酶。
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