[发明专利]与马寒冷适应性相关的TE标记及其应用

权利要求书

1.用于检测与马寒冷适应性相关的TE标记的特异性引物在辅助鉴定中国家马寒冷适应性品种中的应用，其特征在于，若TE标记的种类为缺失，则判定待测马匹可能具有适应寒冷的特性，若TE标记的种类为插入，则判定待测马匹可能具有适应湿热的特性；所述TE标记为位于马第2号染色体第85617679位碱基处的插入缺失，插入缺失的具体核苷酸序列如SEQID NO.1所示；所述TE标记位于如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的第533bp处。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

1）提取待测马匹的基因组DNA；

2）以所述待测马匹的基因组DNA为模板，利用特异性引物进行PCR扩增反应，获得扩增产物片段；

3）检测所述扩增产物片段的第533bp处TE标记的种类，根据TE标记的缺失或插入情况判断马匹可能具有的适应寒冷或适应湿热的特性；

其中，所述特异性引物包括：

正向引物：5’- CTGGACGACATGGGTTGACT -3’；

反向引物：5’- AACTCCAGCTATTTCCCGCC -3’。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤2）的PCR扩增反应中，扩增体系以25μl计为：50-100ng/μl模板DNA 1μl，10pmol/μl正向引物和反向引物各1μl，10mmol/L dNTPmix 2.0μl，5U/μl TaqDNA聚合酶0.125μl，10×PCR反应缓冲液2.5μl，余量为双蒸水；

扩增反应的条件为：94℃预变性5分钟；94℃变性30 秒，66℃退火30秒，72℃延伸90秒，共34个循环；72℃保温5分钟。