[发明专利]一种诱导低温弱光保存海带雄性种质发育的方法

权利要求书

1.一种促进海带雄性种质发育的方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：

1)将海带雄性种质丝状体放入到海水中12-36h，其中温度为4±1℃，每小时升高2℃，直至14±1℃；光照为1000lx，每小时升高1000lx，直至8000lx；

2)将海带雄性种质丝状体进行粉碎，然后将粉碎的丝状体进行过滤获得8-16个细胞大小的丝状体片段；

3)将过滤获得丝状体片段进行培养，培养中的光源是荧光灯，光照强度8000±500lx，光照周期L﹕D＝12h﹕12h，培养温度为14±1℃；采用通气悬浮培养来获得膨大细胞；

4)诱导膨大细胞发育培养，培养中的光源是荧光灯，光照强度4000±200lx，光照周期是L﹕D＝12h﹕12h，培养温度为14±1℃；通气悬浮培养获得幼孢子体；

5)幼孢子体生长：

将发育生成的幼孢子体进行培养，培养中光源是荧光灯，光照强度1000-1500lx，光照周期是L﹕D＝14h﹕10h，培养温度为10±1℃；每三天更换1/3的培养液。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤2)中所述的粉碎，是采用组织搅碎机粉碎，1500转/min，粉碎30s。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤2)中的过滤，是使用单层500目筛绢过滤3-5次。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤3)中培养丝状体片段的培养液组成如下：4ppm的NO₃-N、0.8ppm的PO₄-P、1ppm的FeC₆H₅O₇-Fe、4ppm的GeO₂、2μg/L的VB₁₂。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤4)中用于诱导膨大细胞发育培养的培养液组成如下：4ppm的NO₃-N、0.8ppm的PO₄-P、1ppm的FeC₆H₅O₇-Fe、4ppm的GeO₂、2μg/L的VB₁₂。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤5)中用于幼孢子体生长的培养液组成如下：8ppm的NO₃-N、0.4ppm的PO₄-P、4ppm的GeO₂。