[发明专利]CRP和SAA联合检测试纸条的制备方法以及制得的试纸条、试剂卡和试剂盒

权利要求书

1.一种CRP和SAA联合检测试纸条的制备方法，其特征在于，其包括：

将抗体金标复合物以1.6-2μL/cm的喷量喷涂至金标垫上；

其中，所述抗体金标复合物中含有胶体金标记的第一抗CRP抗体和胶体金标记的第一抗SAA抗体；第一抗CRP抗体的浓度为300μg/ml；第一抗SAA抗体的浓度为50μg/ml。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述抗体金标复合物由如下方法制备：

(a)往胶体金溶液中加入第一抗CRP抗体，得到所述胶体金标记的第一抗CRP抗体；

(b)往胶体金溶液中加入第一抗SAA抗体，得到所述胶体金标记的第一抗SAA抗体；

(c)将所述胶体金标记的第一抗CRP抗体和所述胶体金标记的第一抗SAA抗体混合，得到所述抗体金标复合物；

优选的，步骤(a)中，往胶体金溶液中加入第一抗CRP抗体溶液，得到抗CRP抗体胶体金标记溶液；其中，每mL胶体金溶液加入11-15μL的第一抗CRP抗体溶液，第一抗CRP抗体溶液含有0.8-1.2mg/ml的第一抗CRP抗体；

优选的，步骤(b)中，往胶体金溶液中加入第一抗SAA抗体溶液，得到抗SAA抗体胶体金标记溶液；其中，每mL胶体金溶液加入3-5μL的第一抗SAA抗体溶液，第一抗SAA抗体溶液含有0.8-1.2mg/ml的第一抗SAA抗体；

优选的，步骤(c)中，将所述抗CRP抗体胶体金标记溶液与所述抗SAA抗体胶体金标记溶液混合，得到复合溶液；再往所述复合溶液中加入金标封闭液，混匀后静置；再离心所述复合溶液，取沉淀用重悬液重悬，得到所述抗体金标复合物。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(c)中，所述重悬液为PBS溶液，其含有：0.18-0.22g/ml海藻糖、0.18-0.22g/ml蔗糖、0.008-0.012g/ml PVP40k、0.008-0.012g/ml BSA和8-12μl/ml Tween-20；

优选的，步骤(c)中，每ml所述复合溶液加入150μl所述金标封闭液，所述金标封闭液含有0.8-1％的BSA；

优选的，在步骤(b)中，所用胶体金溶液的pH为8.5；

优选的，在步骤(a)中，所用胶体金溶液中的pH为7.0；

优选的，在步骤(a)或(b)中，用K₂CO₃调节胶体金溶液的pH。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在步骤(a)或(b)中，所用的胶体金溶液通过如下方法制备：

往加热至沸腾状态的水溶液中加入氯金酸溶液，再次加热至沸腾后，加入柠檬酸三钠溶液，加热持续沸腾15-20分钟，冷却至室温，得到所述胶体金溶液，所述胶体金溶液中的胶体金的粒径为45-50nm；

优选的，氯金酸溶液的浓度为0.8-1.2％，每100ml水溶液加入0.8-1ml氯金酸溶液；

优选的，柠檬酸三钠溶液的浓度为0.8-1.2％，每100ml水溶液加入0.8-1ml柠檬酸三钠溶液。

5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：将第二抗CRP抗体和第二抗SAA抗体分别喷涂至硝酸纤维素膜上的CRP检测线和SAA检测线；

喷涂所述第二抗CRP抗体的喷涂量为0.8-1.2μl/cm，第二抗CRP抗体的浓度0.8-1.2mg/ml；

优选的，喷涂所述第二抗SAA抗体的喷涂量为0.8-1.2μl/cm，第二抗SAA抗体的浓度0.6-0.8mg/ml。