[发明专利]一种检测血清抗Annexin A2

权利要求书

1.一种检测血清抗Annexin A₂-IgG抗体的试剂盒，其特征在于，由抗原蛋白AnnexinA₂、固相载体、阳性质控品、标准品、酶标记或化学发光剂标记或生物素标记的抗人IgG、底物显色剂、抗原稀释液、样品稀释缓冲液、抗体稀释液、洗涤液、终止液组成，所述的抗原蛋白Annexin A₂的序列如SEQ ID:1所示，所述的抗原蛋白Annexin A₂上带有His标签肽，所述标准品和阳性质控品为人抗His标签肽免疫球蛋白G，或从血清中提取抗Annexin A₂抗体作为阳性质控品和标准品，所述固相载体选用硝酸纤维素膜、酶标微孔板；所述显色剂为TMB、吖啶酯、AMPPD、4-MUP；所述抗原稀释液为1x PBS pH7.4、NaCL163mM、1%TritonX-100；所述样品稀释缓冲液为0.01M PBS pH7.4+10%新生牛血清；所述抗人IgG稀释液为含有1M D-glucose、2%甘油的0.01M PBS pH7.4；所述抗体稀释液为取1M D-glucose、2%甘油加入含0.35% Tween2的0.01M PBS至100ml；所述洗涤液为：1x PBS pH7.4、NaCL163mM、1%TritonX-100、甘油10%；所述终止液为：2M硫酸；所述抗原蛋白Annexin A₂固定于固相载体上；所述抗原蛋白Annexin A₂经Ni柱亲和层析、分子筛、离子交换柱、疏水柱纯化；所用的抗原蛋白Annexin A₂固定方法为直接包被法，通过物理吸附或化学结合或非共价键结合将抗原蛋白直接固定于固相载体上。

2.根据权利要求1所述的一种检测血清抗Annexin A₂-IgG抗体的试剂盒，其特征在于，试剂盒中抗原Annexin A₂对应的血清自身抗体的相对滴度定量采用统一的标签肽和抗标签肽抗体之间的特异性免疫反应及标准曲线的回归来进行计算。