[发明专利]一种用于神经干细胞快速扩增的培养基

说明书

本发明公开一种用于神经干细胞快速扩增的培养基，所述培养基包括：基础培养基和营养成分，基础培养基为DMEM与F12的混合液，营养成分包括：葡萄糖、谷氨酰胺、NaHCO₃、青霉素、链霉素、胰岛素、转铁蛋白、黄体酮、腐胺和硒。本发明中的培养基中含有胰岛素和硒，胰岛素对于细胞的存活和生长有重要作用，为细胞的存活和生长提供了充分的营养物质，同时，硒是谷胱甘肽产生的合作因子，有助于过氧化物和超氧化物的水解，可以防止细胞的损伤，为细胞的存活和快速增殖提供了有利的条件，保证了其完整性，在使用方法中对培养基使用CO₂进行平衡，添加了多次培养基，保证了培养基中营养物质的充分性，且培养基的含量逐次减半，节省了资源。

技术领域

本发明涉及神经干细胞领域，具体的是一种用于神经干细胞快速扩增的培养基。

背景技术

神经干细胞是指存在于神经系统中，具有分化为神经神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的潜能，从而能够产生大量脑细胞组织，并能进行自我更新，并足以提供大量脑组织细胞的细胞群。神经干细胞的分裂能力强，在进行培养时，需要长时间存在于培养基中进行生长。

现有的培养基中营养成分单一，给神经干细胞的增殖带来了不利的生存环境，在相同时间内增殖的数量低，增殖的干细胞质量差，不利于后期的研究或者使用。同时，培养基中的营养成分并没有保护细胞的功能，增殖后的干细胞容易死亡，也给其他干细胞的存活带来了不理的环境。

发明内容

为解决上述背景技术中提到的不足，本发明的目的在于提供一种用于神经干细胞快速扩增的培养基，本发明中的培养基中含有胰岛素和硒，胰岛素对于细胞的存活和生长有重要作用，为细胞的存活和生长提供了充分的营养物质，同时，硒是谷胱甘肽产生的合作因子，有助于过氧化物和超氧化物的水解，可以防止细胞的损伤，为细胞的存活和快速增殖提供了有利的条件，保证了其完整性；

同时，本发明培养基的使用方法中对培养基使用CO₂进行平衡，保证了培养基的平衡性，同时，添加了多次培养基，保证了培养基中营养物质的充分性，且培养基的含量逐次减半，节省了资源。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种用于神经干细胞快速扩增的培养基，所述培养基包括：基础培养基和营养成分；

所述基础培养基为DMEM与F12的混合液，体积比为1:1；

所述营养成分包括：葡萄糖、谷氨酰胺、NaHCO₃、青霉素、链霉素、胰岛素、转铁蛋白、黄体酮、腐胺和硒。

进一步地，所述营养成分的各组份之间的含量为：葡萄糖6-15g/L，谷氨酰胺3*10^-3mol/L-8*10^-3mol/L，NaHCO₃ 5*10^-3mol/L-12*10^-3mol/L，青霉素60-90mg/ml，链霉素65-85mg/ml，胰岛素2.8-3.5μg/ml，转铁蛋白130-250ng/ml，黄体酮8*10^-9mol/L-15*10^-9mol/L、腐胺30*10^-6mol/L-50*10^-6mol/L，硒50*10^-9mol/L-60*10^-9mol/L。

进一步地，所述营养成分的各组份之间的含量为：葡萄糖10g/L，谷氨酰胺5*10^-3mol/L，10*10^-3mol/L，青霉素75mg/ml，链霉素75mg/ml，胰岛素3.0μg/ml，转铁蛋白190ng/ml，黄体酮12*10^-9mol/L、腐胺40*10^-6mol/L，硒55*10^-9mol/L。