[发明专利]一种用于神经干细胞快速扩增的培养基

权利要求书

1.一种用于神经干细胞快速扩增的培养基，其特征在于，所述培养基包括：基础培养基和营养成分；

所述基础培养基为DMEM与F12的混合液，体积比为1:1；

所述营养成分包括：葡萄糖、谷氨酰胺、NaHCO₃、青霉素、链霉素、胰岛素、转铁蛋白、黄体酮、腐胺和硒。

2.根据权利要求1所述的一种用于神经干细胞快速扩增的培养基，其特征在于，所述营养成分的各组份之间的含量为：葡萄糖6-15g/L，谷氨酰胺3*10^-3mol/L-8*10^-3mol/L，NaHCO₃5*10^-3mol/L-12*10^-3mol/L，青霉素60-90mg/ml，链霉素65-85mg/ml，胰岛素2.8-3.5μg/ml，转铁蛋白130-250ng/ml，黄体酮8*10^-9mol/L-15*10^-9mol/L、腐胺30*10^-6mol/L-50*10^-6mol/L，硒50*10^-9mol/L-60*10^-9mol/L。

3.根据权利要求1所述的一种用于神经干细胞快速扩增的培养基，其特征在于，所述营养成分的各组份之间的含量为：葡萄糖10g/L，谷氨酰胺5*10^-3mol/L，10*10^-3mol/L，青霉素75mg/ml，链霉素75mg/ml，胰岛素3.0μg/ml，转铁蛋白190ng/ml，黄体酮12*10^-9mol/L、腐胺40*10^-6mol/L，硒55*10^-9mol/L。

4.一种用于神经干细胞快速扩增的培养基的使用方法，其特征在于，所述使用方法包括以下步骤：

一、将培养基置于无菌箱中，使用CO₂进行平衡30-40分钟；

二、将神经干细胞放置在培养基内培养，静置培养5-10小时；

三、向无菌箱内再次加入步骤一中的培养基，重复步骤二，如此反复多次，添加培养基的次数为3-5次；

四、待神经干细胞细胞达到85-92％融合度后消化，按照1:2或者1:4比例传代培养，制得神经干细胞。

5.根据权利要求4所述的一种用于神经干细胞快速扩增的培养基的使用方法，其特征在于，所述步骤一中的CO₂浓度为5％-10％，温度为32-34℃。

6.根据权利要求4所述的一种用于神经干细胞快速扩增的培养基的使用方法，其特征在于，所述步骤二中每隔2小时将无菌箱内温度升温0.5℃，直至温度升高至36.5-37.5℃。

7.根据权利要求4所述的一种用于神经干细胞快速扩增的培养基的使用方法，其特征在于，所述步骤三中添加的培养基的含量逐次减半。