[发明专利]一种间充质干细胞生物支架及其制备方法和应用

说明书

本发明实施例公开了一种间充质干细胞生物支架及其制备方法和应用，所述方法为：将间充质干细胞分散于氯化壳聚糖和β‑甘油磷酸钠混合物中形成所述间充质干细胞生物支架。本发明实施例提供以氯化壳聚糖和β‑甘油磷酸钠为原料，制备出温敏性的壳聚糖水凝胶，即本发明实施例的间充质干细胞生物支架，该材料具有物理性能稳定、组织相容性和生物降解性能好的特点，特别是37℃条件下缓慢凝固的特性，适合用于携带间充质干细胞进行骨性关节炎关节腔注射治疗，对细胞的释放起到缓释的作用，起到长期治疗的作用。

技术领域

本发明实施例涉及生物制品技术领域，具体涉及一种间充质干细胞生物支架及其制备方法和应用。

背景技术

骨性关节炎(osteoarthritis,OA)多发生于中老年人，是以关节软骨破坏为特征的疼痛性关节疾病，女性患者发病率高于男性，尤其是肥胖女性更易发病，是导致病残的最常见骨病，给患者生活及工作造成了极大影响。对关节炎主要治疗的方法有止痛、理疗、功能锻炼、饮食调理等，缓解临床症状。现有技术中也有单独采用壳聚糖或者透明质酸，但是治疗效果多比较差，亟待寻找一种可以制备可用于治疗关节炎的材料。

发明内容

为此，本发明实施例提供一种间充质干细胞生物支架及其制备方法和应用，以解决现有技术中缺乏有效的治疗关节炎的材料的问题。

为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：

一种间充质干细胞生物支架的制备方法，将间充质干细胞分散于氯化壳聚糖和β-甘油磷酸钠混合物中形成所述间充质干细胞生物支架。

优选的，所述氯化壳聚糖和β-甘油磷酸钠混合物是由氯化壳聚糖溶液和β-甘油磷酸钠溶液混合而成；

其中，所述氯化壳聚糖溶液的质量分数为2％；

所述β-甘油磷酸钠溶液的质量分数为45％。

优选的，所述氯化壳聚糖和β-甘油磷酸钠混合物是所述氯化壳聚糖溶液与所述β-甘油磷酸钠的体积比为8：2置于冰盒上充分混合形成。

优选的，所述间充质干细胞的制备方法为：

将脐带组织分成3-4cm块状组织，将所述块状组织上加入间充质干细胞无血清培养基，将所述块状组织放在培养板上，置于37℃，体积分数为5％的CO₂培养箱孵育30min后，然后，再加入间充质干细胞无血清培养基继续培养；

在培养的过程中对培养基进行更换，待细胞汇合生长80％以上后，用DPBS溶液浸洗1次，加入重组胰酶1ml消化，使得细胞分离，加入5-6ml DPBS溶液稀释的大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化，离心去掉上清液，用完全培养基重悬细胞；

将所述重悬细胞接种于T25瓶中，在37℃，体积分数为5％的CO₂培养箱培养，培养细胞达80％融合时，进行传代培养得到间充质干细胞。

优选的，所述重悬细胞接种于T25瓶中时，调整细胞密度为5 000个/cm²。

优选的，所述间充质干细胞用β-甘油磷酸钠溶液重悬形成间充质干细胞重悬液，再与所述氯化壳聚糖和β-甘油磷酸钠混合物混合。

优选的，所述间充质干细胞重悬液与所述氯化壳聚糖和β-甘油磷酸钠混合物的体积比为1：4。

本发明实施例还提供上述所述的方法制备的间充质干细胞生物支架。

本发明实施例还提供所述的间充质干细胞生物支架在制备治疗关节炎药物中的应用。