[发明专利]一种间充质干细胞生物支架及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种间充质干细胞生物支架的制备方法，其特征在于，将间充质干细胞分散于氯化壳聚糖和β-甘油磷酸钠混合物中形成所述间充质干细胞生物支架。

2.如权利要求1所述的间充质干细胞生物支架的制备方法，其特征在于，

所述氯化壳聚糖和β-甘油磷酸钠混合物是由氯化壳聚糖溶液和β-甘油磷酸钠溶液混合而成；

其中，所述氯化壳聚糖溶液的质量分数为2％；

所述β-甘油磷酸钠溶液的质量分数为45％。

3.如权利要求1所述的间充质干细胞生物支架的制备方法，其特征在于，

所述氯化壳聚糖和β-甘油磷酸钠混合物是所述氯化壳聚糖溶液与所述β-甘油磷酸钠的体积比为8：2置于冰盒上充分混合形成。

4.如权利要求1所述的间充质干细胞生物支架的制备方法，其特征在于，

所述间充质干细胞的制备方法为：

将脐带组织分成3-4cm块状组织，将所述块状组织上加入间充质干细胞无血清培养基，将所述块状组织放在培养板上，置于37℃，体积分数为5％的CO₂培养箱孵育30min后，然后，再加入间充质干细胞无血清培养基继续培养；

在培养的过程中对培养基进行更换，待细胞汇合生长80％以上后，用DPBS溶液浸洗1次，加入重组胰酶1ml消化，使得细胞分离，加入5-6ml DPBS溶液稀释的大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化，离心去掉上清液，用完全培养基重悬细胞；

将所述重悬细胞接种于T25瓶中，在37℃，体积分数为5％的CO₂培养箱培养，培养细胞达80％融合时，进行传代培养得到间充质干细胞。

5.如权利要求4所述的间充质干细胞生物支架的制备方法，其特征在于，

所述重悬细胞接种于T25瓶中时，调整细胞密度为5 000个/cm²。

6.如权利要求4所述的间充质干细胞生物支架的制备方法，其特征在于，

所述间充质干细胞用β-甘油磷酸钠溶液重悬形成间充质干细胞重悬液，再与所述氯化壳聚糖和β-甘油磷酸钠混合物混合。

7.如权利要求6所述的间充质干细胞生物支架的制备方法，其特征在于，

所述间充质干细胞重悬液与所述氯化壳聚糖和β-甘油磷酸钠混合物的体积比为1：4。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法制备的间充质干细胞生物支架。

9.权利要求8所述的间充质干细胞生物支架在制备治疗关节炎药物中的应用。