[发明专利]快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条及制备方法与试剂盒

说明书

本发明公开了一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条及制备方法与试剂盒。该快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒包括试纸条以及毛发裂解液，所述试纸条包括PVC底板、硝酸纤维素膜、结合垫、样品垫和吸水纸，所述样品垫、所述结合垫、所述硝酸纤维素膜和所述吸水纸沿着水平方向顺序连接在所述PVC底板上，所述硝酸纤维素膜上设有包被BSA‑KET抗原的检测线和羊抗鼠多克隆抗体构成的质控线，所述检测线与所述质控线沿着层析方向顺序分布，所述毛发裂解液包含裂解所有种类毛发蛋白质的有效成分以及防腐剂，所述结合垫上固定有标记氯胺酮单克隆抗体的时间分辨荧光微球和微球稀释液。该试剂盒精密度高、检测时间短、灵敏度高、线性范围宽、成本低廉。

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别是涉及一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条及制备方法与试剂盒。

背景技术

二十多年来，毒品分析技术飞速发展，体液(主要指尿液和血液)仍是检验毒品较好的生物检材，但体液中毒品的检出时限短，吸毒者吸毒后，一般在3至7天就由于代谢而难以通过尿液、血液、唾液精确检测出毒品成分及含量，导致部分吸毒人员借此规避查处和管理；其次，体液不能探究受检者更长一段时间内的吸毒信息；存在检材不易保存等问题。而毛发检测可以反应吸毒人员的吸毒史，但是传统的毛发检测技术中，高效液相色谱法得到结果需要的时间长，操作复杂，不适用于现场执法工作。

发明内容

基于此，有必要提供一种精密度高、检测时间短、灵敏度高、线性范围宽、成本低廉的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条及制备方法与试剂盒。

一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒，包括试纸条以及毛发裂解液，所述试纸条包括PVC底板、硝酸纤维素膜、结合垫、样品垫和吸水纸，所述样品垫、所述结合垫、所述硝酸纤维素膜和所述吸水纸沿着水平方向顺序连接在所述PVC底板上，所述硝酸纤维素膜上设有包被BSA-KET抗原的检测线和羊抗鼠多克隆抗体构成的质控线，所述检测线与所述质控线沿着层析方向顺序分布，所述毛发裂解液包含裂解所有种类毛发蛋白质的有效成分以及防腐剂，所述结合垫上固定有标记氯胺酮单克隆抗体的时间分辨荧光微球和微球稀释液。

在其中一个实施例中，所述结合垫与所述吸水纸分别位于所述硝酸纤维素膜的两侧且均部分搭接所述硝酸纤维素膜，所述样品垫部分搭接所述结合垫。

在其中一个实施例中，所述时间分辨荧光微球选自修饰过的聚苯乙烯微球。

在其中一个实施例中，所述时间分辨荧光微球的表面修饰的官能团为羧基、羟基或环氧基的一种或几种。

在其中一个实施例中，所述时间分辨荧光微球的粒径为100nm～500nm。

在其中一个实施例中，所述时间分辨荧光微球内填充有镧系元素的螯合物。

在其中一个实施例中，所述镧系元素为铕、钐、鈊、镝中的一种或几种。

一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒，包括毛发裂解液以及所述的试纸条，所述毛发裂解液包含裂解所有种类毛发蛋白质的有效成分以及防腐剂。

一种所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，包括如下步骤：

a)制备检测线和质控线：将BSA-KET抗原稀释后划线于硝酸纤维素膜上形成检测线；将羊抗鼠多克隆抗体稀释后划线于所述硝酸纤维素膜上形成质控线，将划好线的所述硝酸纤维素膜烘干；

b)时间分辨荧光微球标记：将时间分辨荧光微球经活化剂室温活化、离心洗涤、超声重悬，加入氯胺酮单克隆抗体震荡混匀、静置偶联，再加入甘氨酸震荡混匀、静置封闭、离心洗涤，再用硼酸缓冲液及BSA复溶、超声重悬，使时间分辨荧光微球均匀分散在硼酸缓冲液中，得到时间分辨荧光微球标记溶液，并于2～8℃避光保存；