[发明专利]快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条及制备方法与试剂盒

权利要求书

1.一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述试纸条包括PVC底板、硝酸纤维素膜、结合垫、样品垫和吸水纸，所述样品垫、所述结合垫、所述硝酸纤维素膜和所述吸水纸沿着水平方向顺序连接在所述PVC底板上，所述硝酸纤维素膜上设有包被BSA-KET抗原的检测线和羊抗鼠多克隆抗体构成的质控线，所述检测线与所述质控线沿着层析方向顺序分布，所述结合垫上固定有标记氯胺酮单克隆抗体的时间分辨荧光微球和微球稀释液。

2.根据权利要求1所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述结合垫与所述吸水纸分别位于所述硝酸纤维素膜的两侧且均部分搭接所述硝酸纤维素膜，所述样品垫部分搭接所述结合垫。

3.根据权利要求1所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述时间分辨荧光微球选自修饰过的聚苯乙烯微球。

4.根据权利要求3所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述时间分辨荧光微球的表面修饰的官能团为羧基、羟基或环氧基的一种或几种。

5.根据权利要求3所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述时间分辨荧光微球的粒径为100nm～500nm。

6.根据权利要求3所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述时间分辨荧光微球内填充有镧系元素的螯合物。

7.根据权利要求6所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述镧系元素为铕、钐、鈊、镝中的一种或几种。

8.一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒，包括毛发裂解液以及权利要求1-7任意一项所述的试纸条，所述毛发裂解液包含裂解所有种类毛发蛋白质的有效成分以及防腐剂。

9.一种权利要求1-7任意一项所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

a)制备检测线和质控线：将BSA-KET抗原稀释后划线于硝酸纤维素膜上形成检测线；将羊抗鼠多克隆抗体稀释后划线于所述硝酸纤维素膜上形成质控线，将划好线的所述硝酸纤维素膜烘干；

b)时间分辨荧光微球标记：将时间分辨荧光微球经活化剂室温活化、离心洗涤、超声重悬，加入氯胺酮单克隆抗体震荡混匀、静置偶联，再加入甘氨酸震荡混匀、静置封闭、离心洗涤，再用硼酸缓冲液及BSA复溶、超声重悬，使时间分辨荧光微球均匀分散在硼酸缓冲液中，得到时间分辨荧光微球标记溶液，并于2℃～8℃避光保存；

c)结合垫制备：玻璃纤维素膜或聚酯膜使用0.1％～1.0％的BSA溶液浸泡处理，烘干得到膜垫；采用微球稀释液稀释所述时间分辨荧光微球标记溶液至工作浓度，将稀释后的所述时间分辨荧光微球标记溶液均匀地喷在所述膜垫上，烘干得到结合垫；

d)样品垫制作：玻璃纤维素膜或聚酯膜上滴加处理液30～60mL，干燥后得到样品垫，所述处理液含有0.1％～3.0％BSA，0.05％～3.0％吐温-80,5～100mmol/L HEPES，pH值为6～10；

e)试纸条的组装：按照权利要求1或2所述的试纸条的结构组装。

10.根据权利要求9所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，其特征在于，将BSA-KET抗原使用20mmol/L柠檬酸盐或磷酸缓冲盐、0.5％～4.0％葡聚糖2万的溶液稀释后划线；将羊抗鼠多克隆抗体使用柠檬酸盐或磷酸缓冲盐，0.5％～4.0％葡聚糖2万的溶液稀释后划线。

11.根据权利要求9所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，其特征在于，步骤a)中，将划线后的所述硝酸纤维素膜置于37℃～45℃下，烘干12h～48h。