[发明专利]一种用于肿瘤细胞分离培养的纳米颗粒及其制备方法有效
| 申请号: | 201911154159.8 | 申请日: | 2019-11-20 |
| 公开(公告)号: | CN110665012B | 公开(公告)日: | 2022-12-06 |
| 发明(设计)人: | 王平;孟爱霞 | 申请(专利权)人: | 潍坊医学院 |
| 主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09 |
| 代理公司: | 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) 11531 | 代理人: | 崔建章 |
| 地址: | 261053 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 肿瘤 细胞 分离 培养 纳米 颗粒 及其 制备 方法 | ||
1.一种用于肿瘤细胞分离培养的纳米颗粒,具有核壳结构,所述纳米颗粒的核是改性纳米分子筛;所述改性纳米分子筛的红外酸度1.0-10.0mg·mol/g,所述改性纳米分子筛是磷酸硅铝分子筛经过改性得到的分子筛;所述颗粒的壳是叶酸接枝聚丙烯酰胺;所述纳米颗粒的粒径为1-100纳米;
所述纳米颗粒的制备方法,包括以下步骤:(1)纳米分子筛分散到去离子水中,惰性气氛下升温到60-80℃,加入纳米分子筛质量10-20%的杂多酸、表面活性剂和分散剂,其中所述杂多酸、表面活性剂和分散剂的质量比为1-3:0.1-0.5:0.3-0.8,搅拌1-6h,过滤洗涤干燥后得到改性纳米分子筛;(2)将叶酸与聚丙烯酰胺溶解在二甲基亚砜中,所述叶酸与聚丙烯酰胺的质量比为0.1-1:1;然后加入氨基吡啶在20-30℃下反应1-10h,离心分离得到叶酸接枝聚丙烯酰胺;(3)将步骤(1)得到的改性纳米分子筛和步骤(2)得到的叶酸接枝聚丙烯酰胺加入有机溶剂中,加入聚合单体,引发剂,惰性气体下60-80℃搅拌反应5-10h,反应结束后用去离子水洗涤,并在60-90℃下真空干燥得到所述纳米颗粒;
所述磷酸硅铝分子筛是SAPO-34或SAPO-44;
步骤(1)中所述杂多酸是PW12O403-、PW11VO404-、PMo12O403-、SiMo12O404-中的一种;
步骤(1)中所述表面活性剂是石油磺酸盐、十二烷基磺酸钠、木质素磺酸盐中的一种;所述分散剂是丙酮、乙醇、乙酸、丙醇、丙二醇中的一种;
步骤(3)中所述单体是丙烯酸、甲基丙烯酸或甲基丙烯酸酯中的一种;引发剂是过硫酸钾、过硫酸钠、过氧化苯甲酰中的一种;有机溶剂是乙醇、丙醇或丁醇中的一种。
2.如权利要求1所述的纳米颗粒,其特征在于所述改性纳米分子筛的红外酸度是3.0-5.0mg。
3.如权利要求1所述的纳米颗粒,其特征在于,所述纳米颗粒的粒径为10-30纳米。
4.如权利要求1所述的纳米颗粒,其特征在于步骤(2)中所述聚丙烯酰胺的重均分子量为1000-30000。
5.如权利要求4所述的纳米颗粒,其特征在于步骤(2)中所述聚丙烯酰胺的重均分子量为3000-5000。
6.利用权利要求1-3任一项所述纳米颗粒进行肿瘤细胞分离的方法,将所述纳米颗粒置于待分离细胞溶液中,充分搅拌后,置于电场强度为10-36V/cm的电场中,静置1-10min,收集聚集的纳米颗粒,加入生理盐水中搅拌静置分层,去除底层的纳米颗粒,即可得到分离的肿瘤细胞;所述纳米颗粒在细胞溶液中的浓度为0.1-5wt%。
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