[发明专利]埃博拉病毒感染细胞模型的制备与应用

权利要求书

1.制备埃博拉病毒感染细胞模型的方法，包括1)和2)：

1)利用Ebola trVLP系统获得埃博拉转录复制相关病毒样颗粒；

2)利用所述埃博拉转录复制相关病毒样颗粒感染重组细胞，获得埃博拉病毒感染细胞模型；所述重组细胞为含有埃博拉病毒基因的重组小鼠原代细胞，所述埃博拉病毒基因为埃博拉病毒的VP35基因、NP基因、VP30基因和L基因；

所述重组小鼠原代细胞按照包括如下步骤的方法制备：向小鼠中导入所述埃博拉病毒基因，得到转基因小鼠；分离所述转基因小鼠的骨髓细胞，对所述骨髓细胞进行诱导得到树突状细胞，所述树突状细胞即为所述重组小鼠原代细胞；

所述转基因小鼠按照如下步骤制备：

将VP35基因、NP基因与VP30基因均通过P2A linker串联，将得到的DNA片段命名为EF，分别将含有EF的序列1所示的DNA片段Rosa L-CAG-LoxP-EM7-Kan-SV40-polyA-LoxP-EF-WPRE-bGHpA-Rosa R和含有L基因的序列2所示的DNA片段Rosa L-CAG-LoxP-EM7-Kan-SV40-polyA-LoxP-L-WPRE-bGHpA-Rosa R与BAC载体进行同源重组，将得到的两个重组载体分别记为BAC-EF和BAC-L；

通过显微注射BAC-EF和BAC-L进行小鼠转基因，分别获得Rosa26-LSL-EF小鼠和Rosa26-LSL-L小鼠，将Rosa26-LSL-EF小鼠和Rosa26-LSL-L小鼠进行杂交，得到双阳性小鼠即为Rosa26-LSL-RNP小鼠；

将Rosa26-LSL-RNP小鼠与CMV-Cre小鼠杂交，得到三阳性后代即所述转基因小鼠。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述转基因小鼠通过将所述埃博拉病毒基因表达盒导入所述小鼠中得到。