[发明专利]一种RS1-KO小鼠模型的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种试剂，其特征在于，包括：

(a) 基因编辑蛋白或其表达载体，所述基因编辑蛋白选自下组：CasRx、Cpf1、Cas9、Cas13a、Cas13b、Cas13c、或其组合；和

(b) gRNA或其表达载体，其中所述gRNA是引导所述基因编辑蛋白特异性结合RS1基因的RNA其中，所述gRNA的靶向位点序列为sgRNA1和sgRNA2，所述sgRNA1的靶向核酸序列如SEQ ID NO:1所示：AGGGGACTATGTGGCTTAATTGG；所述sgRNA2的靶向核酸序列如SEQ ID NO:2所示：GGTATGTACTATTCTACTATTGG。

2.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述组分(a)和/或(b)中的所述表达载体为病毒载体。

3.如权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述的病毒载体为逆转录病毒。

4.如权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述的病毒载体选自下组：腺相关病毒(AAV)、腺病毒、慢病毒、疱疹病毒、SV40、痘病毒、或其组合。

5.如权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述的病毒载体选自下组：慢病毒、腺病毒、腺相关病毒(AAV)、或其组合。

6.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂的剂型选自下组：冻干制剂、液体制剂、或其组合。

7.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂的剂型为注射剂型。

8.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述组分(a)与组分(b)的重量比为2:1-0.5:1。

9.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂中，所述组分(a)的含量为1-70wt%。

10.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂中，所述组分(b)的含量为0.1-70wt%。

11.一种X连锁视网膜劈裂症(X-Linked juvenile Retinoschisis，XLRS) 的非人哺乳动物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(m1)提供一种非人哺乳动物的细胞，使用如权利要求1所述的试剂处理所述细胞，将所述细胞中RS1基因转录本的第一个外显子切除，得到视网膜劈裂蛋白失活的非人哺乳动物细胞；和

(m2)利用步骤(m1)中得到的视网膜劈裂蛋白失活的细胞，制备得到视网膜劈裂蛋白失活的X连锁视网膜劈裂症的非人哺乳动物；

并且所述非人哺乳动物为小鼠。

12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：(m3) 对步骤(m2)获得的非人哺乳动物进行杂交，从而获得视网膜劈裂蛋白失活的纯合子代。