[发明专利]阴道毛滴虫荧光免疫层析测定试剂盒及其制备方法

说明书

本发明提供一种阴道毛滴虫荧光免疫层析测定试剂盒及其制备方法，包括检测卡、SD卡和样品稀释液；所述检测卡由一壳体和免疫层析试纸条组成，所述免疫层析试纸条位于壳体内部，包括底板，所述底板上沿其长度方向顺次设置有一样品垫、一结合垫、硝酸纤维素膜和一吸样垫，所述结合垫上固定有荧光微球标记的抗阴道毛滴虫单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上设置有检测T线和质控C线，所述T线上包被有与所述荧光微球标记的单克隆抗体配对的单克隆抗体，所述C线上包被有与所述荧光微球标记的单克隆抗体配对的二抗。本发公开的试剂盒检测灵敏度、准确度、精密度均更高，对于动态监测患者病情、预后评估及检测复发、指导临床医生及时作出重要的医学决策均有重要意义。

技术领域

本发明属于微生物免疫检测技术领域，更具体地说，涉及一种阴道毛滴虫荧光免疫层析测定试剂盒及其制备方法。

背景技术

阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis)是寄生在人体阴道和泌尿道的鞭毛虫，主要引起滴虫性阴道炎和尿道炎，是以性传播为主的一种传染病。

阴道毛滴虫是一种寄生虫，但是肉眼看不见，这种毛滴虫呈广梨形或椭圆形，长为10～30μm，宽10～20μm，头部有4根与虫体等长的鞭毛，在显微镜下可以清楚地看到这种毛滴虫。毛滴虫对不同的环境适应力很强，能在25℃～42℃条件下生长繁殖，3℃～5℃的低温可生存21天，在46℃时仍能生存20～60分钟，脱离人体后在半干燥的条件下也可生存数小时。毛滴虫不但寄生于缺氧的阴道内，并可侵入尿道和尿道旁腺，甚至于上行至输尿管及肾盂。最适宜于毛滴虫生长的pH值是5.5～6，如pH为5以下或7.5以上则毛滴虫的生长会受到抑制。毛滴虫可引起阴道滴虫病和男性滴虫性非淋菌性尿道炎。阴道毛滴虫的致病力随着虫株及宿主生理状况、免疫功能、内分泌以及阴道内细菌或真菌感染等而改变，尤其是妇女在妊娠及泌尿生殖系统生理失调时更易出现炎症。感染数天后，阴道粘膜出现充血、水肿、上皮细胞变性脱落，白细胞炎症反应。健康妇女阴道因乳酸杆菌作用，pH值维持在3.8～4.4之间，可抑制其他细菌生长，不利于滴虫生长，称为阴道的自净作用。然而滴虫在阴道中消耗糖原，妨碍乳酸杆菌的酵解作用，影响乳酸浓度，从而使阴道pH转为中性或碱性。妊娠及月经后的阴道生理周期使pH接近中性，这些都有利于滴虫繁殖，因而感染和复发率较高。目前多采用的是微生物染色方法鉴别阴道分泌物中的阴道毛滴虫，染色过程简单，阅片较为复杂，且灵敏度低，阅片速度和实验员的经验有很大关系。最大问题是只能定性，不能作为定量检测。这是本领域人员函待解决的问题。

中国专利CN107132353A公开了一种B族链球菌的检测试剂盒及其制备方法，虽然也能给出定量检测结果，但是其采用ABS系统，制备工艺复杂，且需要两株抗体分别标记，有两个结合垫，两个样本处理液，使用时需要按比例混合，系统误差大，不利于CV的控制。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种检测误差小，准确度高的阴道毛滴虫荧光免疫层析测定试剂盒。

本发明的第二个目的在于，提供一种检测误差小，准确度高的阴道毛滴虫荧光免疫层析测定试剂盒的制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供了一种阴道毛滴虫荧光免疫层析测定试剂盒，其特征在于，包括检测卡、SD卡和样品稀释液；

所述检测卡，由一壳体和免疫层析试纸条组成，所述免疫层析试纸条位于壳体内部，包括底板，所述底板上沿其长度方向顺次设置有一样品垫、一结合垫、硝酸纤维素膜和一吸样垫，所述结合垫上固定有荧光微球标记的抗阴道毛滴虫单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上设置有检测T线和质控C线，所述T线上包被有与所述荧光微球标记的单克隆抗体配对的单克隆抗体，所述C线上包被有与所述荧光微球标记的单克隆抗体配对的二抗；

所述SD卡内存储有标准曲线，采用平板计数法与光密度法关系曲线建立定标方式，使用定标浓度与仪器信号值关系曲线建立标准曲线，实现定量检测；

所述样品稀释液包括磷酸盐缓冲液和亲水性表面活性剂。