[发明专利]一种检测人18个基因的转录产物的复合扩增试剂盒及其应用有效
| 申请号: | 201911125324.7 | 申请日: | 2019-11-15 |
| 公开(公告)号: | CN111235281B | 公开(公告)日: | 2023-03-17 |
| 发明(设计)人: | 谢建辉;刘宝年;杨沁蕊 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人: | 吴桂琴 |
| 地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 18 基因 转录 产物 复合 扩增 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种同时检测人18个基因的转录产物的复合扩增试剂盒,其特征在于,包括用于检测如下18个基因的转录产物的引物:ALAS2、HBB、MMP7、MMP10、MMP11、KLK3、PRM1、PRM2、MIOX、UMOD、ESR1、CYP2B7P1、SPINK5、MUC7、STATH、HTN3、18S-rRNA及ACTB;
所述的引物的序列是,ALAS2引物SEQ ID NO:1~2、HBB引物SEQ ID NO:3~4、MMP7引物SEQ ID NO:5~6、MMP10引物SEQ ID NO:7~8、MMP11引物SEQ ID NO:9~10、KLK3引物SEQID NO:11~12、PRM1引物SEQ IDNO:13~14、PRM2引物SEQ ID NO:15~16、MIOX引物SEQ IDNO:17~18、UMOD引物SEQ ID NO:19~20、ESR1引物SEQ ID NO:21~22、CYP2B7P1引物SEQID NO:23~24、SPINK5引物SEQ ID NO:25~26、MUC7引物SEQ ID NO:27~28、STATH引物SEQID NO:29~30、HTN3引物SEQ ID NO:31~32、18S-rRNA引物SEQ ID NO:33~34、ACTB引物SEQ ID NO:35~36;
同时检测人18个基因的转录产物中,使用包含18对引物的混合物进行PCR反应,PCR反应条件为95℃/5分钟→28个循环,每个循环反应条件为95℃/30秒,60℃/90秒,72℃/30秒,→68℃/1小时→4℃保持。
2.根据权利要求1所述的复合扩增试剂盒,其特征在于,所述用于检测基因转录产物的引物,每个基因引物对中至少有一条引物的5’端是经过荧光分子标记的。
3.根据权利要求2所述的复合扩增试剂盒,其特征在于,所述的荧光分子选自Fluorescein、JOE、TMR-ET、CXR-ET、PET、NED、VIC或6-FAM中的1种或多种。
4.根据权利要求1-3任一所述的复合扩增试剂盒,其特征在于,所述荧光标记复合扩增试剂盒还包含PCR扩增相关的试剂。
5.根据权利要求1-4任一所述的复合扩增试剂盒在生物检材的组织来源鉴定中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述生物检材来自血液、血斑、月经血、月经血斑,精液、精斑、尿液、尿渍、阴道分泌物、阴道拭子、唾液、口腔拭子或它们的混合物。
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