[发明专利]一种去除卵细胞细胞核的方法

权利要求书

1.一种去除卵细胞细胞核的方法，其特征在于，包括体外成熟卵母细胞获取、去除卵细胞透明带和切割卵母细胞除核步骤。

2.根据权利要求1所述的去除卵细胞细胞核的方法，其特征在于，所述体外成熟卵母细胞获取包括如下步骤：选择健康，处于发情前期的5～8周龄雌鼠，无菌手术摘取输卵管壶腹部，用M2漂洗2～3次，夹取输卵管在显微镜用注射器针头划破输卵管壶腹部，收集卵丘-卵母细胞复合物，将复合物转移至透明质酸酶中慢慢吹打脱去颗粒细胞；收集MII期的卵母细胞并用M2洗3～4次，将获取的MII期的卵母细胞置于培养箱中。

3.根据权利要求1所述的去除卵细胞细胞核的方法，其特征在于，所述去除卵细胞透明带，将所述的MII期的卵母细胞采用链霉蛋白酶处理至透明带消化后，转入FBS胎牛血清溶液中终止消化，将去除透明带的卵母细胞置于培养箱中。

4.根据权利要求3所述的去除卵细胞细胞核的方法，其特征在于，所述链霉蛋白酶的浓度为0.3～1.0％。

5.根据权利要求3所述的去除卵细胞细胞核的方法，其特征在于，所述FBS胎牛血清浓度为5～15％。

6.根据权利要求1所述的去除卵细胞细胞核的方法，其特征在于，所述切割卵母细胞除核包括如下步骤：将透明带已消化的卵母细胞移入切割滴中，在显微镜下快速切割卵细胞，切割后弃去含极体1/3～1/2的胞质。

7.根据权利要求6所述的去除卵细胞细胞核的方法，其特征在于，所述切割滴为2.0～3.0ug/mL细胞松弛素B。

8.根据权利要求2或3所述的去除卵细胞细胞核的方法，其特征在于，所述培养箱的温度35～40℃，CO₂含量为3～8％。