[发明专利]华支睾吸虫液滴式数字PCR检测试剂盒及应用在审
| 申请号： | 201911112701.3 | 申请日： | 2019-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN110760596A | 公开（公告）日： | 2020-02-07 |
| 发明（设计）人： | 沈玉娟;徐梦;曹胜魁;张小凡;曹建平 | 申请（专利权）人： | 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 31325 上海市汇业律师事务所 | 代理人： | 王函 |
| 地址： | 200025 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 华支睾吸虫 探针 引物 检测试剂 华支睾吸虫感染 氧化酶亚单位 特异性引物 细胞色素C 高效检测 疾病诊断 上游引物 下游引物 荧光探针 粪便DNA 数字PCR 试剂盒 液滴式 感染 检测 可用 制备 灵敏 基因 敏感 应用 成功 | ||
1.一种华支睾吸虫液滴式数字PCR检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括根据华支睾吸虫细胞色素C氧化酶亚单位1基因COI基因设计的特异性引物及荧光探针。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述特异性引物及荧光探针的序列如下：
其上游引物为如SEQ ID NO.1所示序列；其下游引物为如SEQ ID NO.2所示序列；
所述荧光探针为如SEQ ID NO.3所示序列；所述荧光探针的5’端和3’端分别连接有荧光报告基团和荧光淬灭基团；荧光报告基团包括：FAM、VIC、HEX、CY5和ROX；荧光淬灭基团包括：MGB、BHQ1、Eclipse 和TAMRA。
3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光报告基团为FAM；所述荧光淬灭基团为BHQ1。
4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括以下液滴式数字PCR反应体系：2× ddPCR预混液10µl，DNA模板1µl，10µmol如权利要求1所述的上游引物和下游引物各1µl，10µmol如权利要求1-3任一项所述的探针0.5µl，无菌水6.5µl，共20µl。
5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述液滴式数字PCR的退火温度为53℃-60℃。
6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述液滴式数字PCR的退火温度为56℃。
7.如权利要求1-6任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述液滴式数字PCR的扩增反应条件如下：
。
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述液滴式数字PCR的扩增反应条件中的升降温度梯度为2 ℃/s；反应总体积设为40 µl。
9.如权利要求1-9任一项所述的试剂盒在制备感染华支睾吸虫疾病诊断产品中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所，未经中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201911112701.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
