[发明专利]阿魏菇中抗氧化多糖提取物及其制备方法和应用

权利要求书

1.阿魏菇中抗氧化多糖提取物，其特征在于：所述的抗氧化多糖提取物G-1、AG-1和AG-2来自阿魏菇，是分子量为168kDa、204kDa和132kDa的纯多糖，具有一定的抗氧化活性。

2.根据权利要求1所述的阿魏菇中抗氧化多糖提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)将阿魏菇子实体50℃烘干并研磨成粉，加入8倍体积蒸馏水，80℃水浴震荡浸提6h，过滤所得滤渣再次浸提，合并滤液，4000～8000rpm离心10～20min，收集上清液，即得阿魏菇子实体多糖粗提液；

2)将阿魏菇子实体多糖粗提液用旋转蒸发仪进行旋转蒸发浓缩，加入4倍体积无水乙醇，2～6℃放置8～16小时，10000rpm离心20min，收集沉淀，即得阿魏菇多糖粗提物；

3)将阿魏菇多糖粗提物用蒸馏水进行复溶，得到多糖溶液，置于分液漏斗中，用Sevage法除蛋白，剧烈震荡，静置，等到水相和有机相之间的界面出现白色时，将分液漏斗打开，将下层有机相和中间白色絮状物去除，重复上述操作3-5次；取上层水相，装入分子截留量为3500Da的透析袋中，在4℃、足量蒸馏水中透析8～20小时，反复3～5次，再经旋转蒸发除去残留的有机溶剂，冷冻干燥,即得阿魏菇多糖粗粉；

4)将阿魏菇多糖粗粉溶解于10mM、pH 7.4的Tris-HCl缓冲液中，上样于DEAE-Sepharose F.F阴离子色谱层析柱，用0-2mol/LTris-HCl-NaCl溶液连续梯度洗脱，用分布收集器收集洗脱液，蒽酮-硫酸法与分光光度计法跟踪监测每管洗脱液，根据吸光值绘制曲线，收集洗脱峰，透析后冻干；

5)将每一个洗脱峰的多糖样品，分别上样于Sephadex G-75葡聚糖凝胶色谱层析柱进一步纯化，用蒸馏水洗脱，用分布收集器收集洗脱液，蒽酮-硫酸法与分光光度计法跟踪监测每管洗脱液，根据吸光值绘制曲线，收集洗脱峰，透析后冻干；获得阿魏菇抗氧化多糖提取物G-1、AG-1和AG-2。

3.权利要求1或2所述的阿魏菇中抗氧化多糖提取物的应用，该多糖具有抗小鼠红细胞溶血和一定的清除DPPH及羟基自由基的作用，其特征在于：用于治疗因自由基引起氧化应激水平升高导致疾病的有效、无毒药物方面的应用。