[发明专利]一种快速检测山羊ADIPOQ基因SNP的方法及专用试剂盒在审
| 申请号： | 201911107828.6 | 申请日： | 2019-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN110643720A | 公开（公告）日： | 2020-01-03 |
| 发明（设计）人： | 安清明;黄永震;刘贤;王旭;文逸凡;杨鹏;王大会;李志明;王献伟;贺花;张子敬 | 申请（专利权）人： | 铜仁学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 61200 西安通大专利代理有限责任公司 | 代理人： | 范巍 |
| 地址： | 554300 贵州省铜*** | 国省代码： | 贵州;52 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 山羊 单核苷酸多态性位点 基因 琼脂糖凝胶电泳 限制性内切酶 全基因组DNA 专用试剂盒 电泳结果 分子标记 分子育种 辅助选择 快速检测 良种繁育 基因型 体高 消化 检测 | ||
1.一种检测山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于：包括以下步骤：
以山羊基因组DNA为模板，通过PCR扩增ADIPOQ基因的部分片段，将扩增产物经限制性内切酶AvaII酶切后进行琼脂糖凝胶电泳，根据电泳结果鉴定山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性位点的基因型，所述山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性位点为山羊ADIPOQ基因参考基因组序列NC_030808.1的14059C>T单核苷酸突变位点。
2.如权利要求1所述一种检测山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于：所述ADIPOQ基因的部分片段包含14059C>T单核苷酸突变位点，扩增该片段的引物对为：
上游引物F1：5’-GGTTAAGCTTCTTTACCACAGAGTG-3’
下游引物R1：5’-CTTCCACACTGACCGAAGTC-3’。
3.如权利要求1所述一种检测山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于：所述PCR的扩增反应体系包括10ng/μL模板DNA 1μL以及10pmol/L的上、下游扩增引物各0.5μL。
4.如权利要求1所述一种检测山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于：所述PCR采用的扩增反应程序为：94～95℃预变性5min；94～95℃变性30s，54.1℃退火30s，72℃延伸25～60s，35个循环；72℃延伸10min。
5.如权利要求1所述一种检测山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于：所述琼脂糖凝胶的质量浓度为2.5％。
6.如权利要求1所述一种检测山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于：所述山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性位点的电泳鉴定结果为：CC基因型表现为46bp和272bp的两条条带，CT基因型表现为272bp、46bp和318bp的三条条带，TT基因型表现为318bp的一条条带。
7.一种如权利要求1所述的检测山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性的方法在山羊分子标记辅助选择育种中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性位点的CT和TT基因型为山羊生长性状早期选择的分子育种基因标记。
9.一种检测山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性的试剂盒，其特征在于：包括基于PCR-RFLP法对位于山羊ADIPOQ基因参考基因组序列NC_030808.1的14059C>T单核苷酸突变位点进行基因分型的扩增引物对，以及限制性内切酶AvaII。
10.根据权利要求9所述一种检测山羊ADIPOQ基因单核苷酸多态性的试剂盒，其特征在于：所述扩增引物对的序列为：
上游引物F1：5’-GGTTAAGCTTCTTTACCACAGAGTG-3’
下游引物R1：5’-CTTCCACACTGACCGAAGTC-3’。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于铜仁学院，未经铜仁学院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201911107828.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
