[发明专利]一种用于细胞抗衰老的溶性因子制剂的制备方法

说明书

本发明公开一种用于细胞抗衰老的溶性因子制剂的制备方法，包括以下步骤：取新鲜冷冻的血浆融化，升温得到融化血浆，然后经过离心机离心得到沉淀，再使用过滤器过滤得到滤液，静置得到二次沉淀；然后将沉淀进行溶解，溶解后再使用离心机离心，取上清液，将上清液使用SD法病毒灭活后，进行纯化，再进行除菌、分装、冻干，冻干结束后，作干热处理，即得。本发明得到的溶性因子制剂具有良好的活性回收率、试验有效率，同时，每吨血浆制得的因子制剂的含量较高，生产效率高；同时，本发明采用新鲜冷冻的血浆的冷冻时间为：0.5‑1.5年，冷冻时间合适，避免了因为冷冻时间较短或者较长导致血浆的质量受到影响，保证了细胞因子制剂的质量。

技术领域

本发明涉及抗衰老的因子制剂的制备领域，具体的是一种用于细胞抗衰老的溶性因子制剂的制备方法。

背景技术

细胞因子制剂，由免疫系统细胞以及其他类型细胞主动分泌的一类小分子量的可溶性蛋白质。包括淋巴因子干扰素、白介素、肿瘤坏死因子、趋势化因子和集落刺激因子等。是免疫系统细胞间，以及免疫统细胞与其他类型细胞间联络的核心，能改变分泌细胞自身或其他细胞的行为或性质，通过与细胞异的膜受体而起作用。

细胞因子制剂由于种类的不同，可以具有抗衰老作用：促进皮肤细胞再生，延缓皮肤老化，可以促进真皮层成纤维细胞的生长与分化，增加皮肤的修复能力，加速伤口愈合。另一方面，能加速皮肤新陈代谢的速率，促使表皮老化细胞更新脱落，并且使皮肤弹性明显提高，减少皱纹的产生，改善皮肤肤质。

在现有技术中，细胞因子制剂的活性回收率较低、定量血浆制得的因子制剂量较少，生产效率低。同时，原料血浆由于冷冻时间过长，也会导致抗衰老效率降低，影响医疗效果。

发明内容

为解决上述背景技术中提到的不足，本发明的目的在于提供一种用于细胞抗衰老的溶性因子制剂的制备方法，本发明得到的溶性因子制剂具有良好的活性回收率、试验有效率，同时，每吨血浆制得的因子制剂的含量较高，生产效率高；

同时，本发明采用新鲜冷冻的血浆的冷冻时间为：0.5-1.5年，冷冻时间合适，避免了因为冷冻时间较短或者较长导致血浆的质量受到影响，保证了细胞因子制剂的质量。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种用于细胞抗衰老的溶性因子制剂的制备方法，所述因子制剂的制备方法包括以下步骤：

一、取新鲜冷冻的血浆，自然静置1-2小时，融化得到0℃的融化血浆；

二、取15-20℃的恒温温水，将步骤一得到的融化血浆进行升温，得到10℃的融化血浆；

三、将步骤二得到的融化血浆使用离心机离心10-15分钟，得到沉淀；

四、将步骤三得到的沉淀过滤2-3次，使用过滤器过滤得到滤液和杂质，取滤液，静置得到二次沉淀；

五、将上述得到的沉淀进行溶解，溶解后再使用离心机离心15-20分钟，用氢氧化铝吸附后，取上清液；

六、将上清液使用SD法病毒灭活后，进行纯化；

七、再进行除菌、分装、冻干，冻干结束后，作2-4天的80-90℃干热处理，即得，然后用于检测。

进一步地，所述步骤一中的血浆冷冻时间为1.5-2年，冷冻温度为-25±5℃。

进一步地，所述步骤二中的升温方法为水浴法。

进一步地，所述步骤三和步骤五中的离心力分别为：20000-25000g和25000-35000g。

进一步地，所述步骤六中采用以Toyopear l DEAE 650M为凝胶为填料的离子交换层析作纯化。