[发明专利]一种检测血液中地高辛的方法

说明书

本发明的检测血液中地高辛的方法包括：制备地高辛标准储备液、制备地高辛的标准中间液、制备内标工作液、制备标准溶液和利用液相色谱‑质谱联用仪检测标准溶液，拟合得到地高辛对应的标准曲线方程为：y₁＝a*x₁+b；对待测血液进行处理，利用液相色谱‑质谱联用仪检测对待测血液，计算出待测血液中的地高辛浓度。在本发明中，对待测血液样品的处理方法以及内标物的选择，使得地高辛的识别更为准确，分析时间短、干扰小，内标定量适宜特异性强、灵敏度高，同时，回收率，检测限和精密度等各项技术指标均符合要求，从而提高检测结果的准确度，消除系统误差。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，特别涉及一种检测血液中地高辛的方法。

背景技术

地高辛是中效强心苷类药物，在治疗时，对心脏的作用表现为正性肌力作用，减慢心率，抑制心脏传导。适用于低输出量型充血性心力衰竭、心房颤动、心房扑动、阵发性室上性心动过速。故对地高辛的监测具有重要的临床意义。

目前，检测服用地高辛的患者的血液样本时，通常采用高效液相色谱法进行测试。

但是，通过上述方法检测血液样本中的地高辛含量时，需要对血液样本进行前处理，例如，沉淀蛋白。由于沉淀蛋白处理不能较好的去除杂质的干扰，从而使得检测时间长，导致血液样本的检测效率低。

发明内容

本发明实施例提供了一种检测血液中地高辛的方法，能够提高血液样本的检测效率。

本发明的检测血液中地高辛的方法，其中：它包括以下步骤：

(一)标准溶液的标定

(a)制备地高辛标准储备液

精确称取地高辛标准品2.0mg置于7mL冻存管，用含水量为0％-30％的甲醇溶液进行溶解，并定容于2mL，得到地高辛标准储备液，在-80℃条件下保存；

(b)制备地高辛的标准中间液

用含水量为10％～80％甲醇稀释液稀释上述地高辛标准储备液，制成含有浓度为4ng/mL～200ng/mL的地高辛的至少三种地高辛的标准中间液，并在-80℃条件下保存；

(c)制备内标工作液

用含水量为10％～80％甲醇稀释液稀释地高辛-d3储备液，得到一种含有10～100ng/mL地高辛-d3的内标工作液，并在-80℃条件下保存；

(d)制备标准溶液

分别移取10μL上述至少三种浓度的地高辛标准中间液，在上述每一种地高辛标准中间液中分别加入10μL的内标工作液和190μL的空白血清，并在转速为1000～2000rpm下涡旋混匀30s～1min，再加入1mL甲基叔丁基醚萃取液，并在转速为2000～4000rpm下涡旋混匀5～10min，以达到充分萃取的目的，再在转速为10000～15000rpm下离心10min，得到上清液，取上清液用氮气缓慢吹干，并加入100μL复溶液混匀超声1min，在转速为10000～15000rpm下离心3min，取上清液制成至少三种不同浓度的标准溶液，其中，每一种浓度的标准溶液中包含的内标物的浓度相同；

(e)拟合标准曲线方程