[发明专利]一种快速鉴定东革阿里化学成分的方法

说明书

本发明属于植物药提取物成分的鉴定分析技术领域，更具体地涉及一种快速鉴定东革阿里化学成分的方法。本发明采用超高效液相色谱‑四级杆串联飞行时间质谱UPLC‑Q‑TOF‑MS分析法快速鉴定东革阿里包含苦木素二萜类化合物、生物碱类化合物、木脂素类化合物和角鲨烯衍生物类化合物共48种化学成分的方法，可为深入阐明东革阿里的药效物质基础及其质量标准研究提供可靠的方法，可以快速分析复杂样品中的东革阿里特征成分，从而可以快速鉴定出保健产品或者复方药材是否含有东革阿里，或者可以用该方法进行东革阿里的原产地质量认证等应用。

技术领域

本发明属于植物药提取物成分的鉴定分析技术领域，更具体地涉及一种快速鉴定东革阿里化学成分的方法。

背景技术

东革阿里(Eurycoma longifolia Jack)为苦木科(Simaroubaceae)东革阿里属植物，广泛分布于马来西亚、印度尼西亚、越南等东南亚国家。在原产地被称为马来西亚人参、天然伟哥等，与燕窝、锡器一起并称为马来西亚三大国宝，是东南亚最珍贵的应用植物药之一。东革阿里全株均可入药，常以根入药，在东南亚作为药品和补品已有数百年的历史，可作单味药、亦可作方中配药，具有抗癌、抗疟疾、抗菌、抗寄生虫、改善男性性功能障碍等功效，还能提升人体机能、减轻疲劳、调节免疫、杀菌、抗溃疡、降血压、抗血管生成、治疗糖尿病、抗焦虑、镇痛抗炎及抗骨质疏松等多种功效，是东南亚最珍贵的应用植物药之一。随着新的药理作用的不断发现，东革阿里越来越受到研究者的重视。因此，未来的研究重点在于从东革阿里多个化学成分中分离出有效的单体进行药理毒理研究，使其应用更加安全有效，为东革阿里药材及制剂的质量控制和进一步的深入研究奠定基础。

本属植物所分离得到的化学成分以quassinoid骨架的二萜类(quassinoidditerpenoids，苦木素二萜)与β-咔巴啉(β-carboline)类生物碱为主，此外尚有canthin-6-one(铁屎米-6-酮)类生物碱、角鲨烯衍生物、联苯木脂素类、tirucallane骨架的三萜类、香豆素类、氨基酸类、甾醇类等成分，近年来又不断有新的化学成分被分离鉴定。东革阿里众多药理作用中，最具有价值的是改善性功能、增强男性生育能力、抗疟活性以及抗肿瘤活性，具有以上作用的活性成分主要为苦木素二萜化合物，而宽缨酮(Eurycomanone，EN)是其中最具代表性的一种，故常被作为评价东革阿里提取物质量的指标之一。目前，国外学者，尤其是马来西亚学者对东革阿里化学成分及药理作用进行了较多的研究，但国内学者对其研究还处于滞后状态。

东革阿里的市场供给主要还是以自然资源为主，少量人工栽培。国内目前尚无东革阿里种植，市场上的东革阿里药材几乎全部来自东南亚以马来西亚居多。东革阿里在自然界中生长极其缓慢，而且由于其生长环境因子不同，不同生长地点的东革阿里中化学成分含量亦不同，导致不同产地原材料质量参差不齐。通常情况下，东革阿里的次级代谢产物往往含量较低，且成分复杂，为了更好地检测其中成分，往往需要进行提取与富集。而不同产区在地理分布、生态环境及生长周期等方面的差异性，可能导致其中化学成分的差异，进而影响品质和疗效。因此建立简捷、快速、痕量的东革阿里的质量分析方法具有重要的意义。

近年来，随着现代分析技术的发展，液质联用技术成为天然药物复杂体系中活性成分的快速分离和鉴定的有力手段。超高压液相色谱(UPLC)是一个集高分辨率、高灵敏度和高速度于一身的现代分离技术；UPLC-Q-TOF-MS联用技术是有效研究中药复杂体系中化学成分分析和鉴定的工具，其分析周期短、灵敏度高，可在获得化合物的准确分子质量碎片信息的基础上，对被测成分进行快速、痕量的分析鉴别。UPLC-Q-TOF-MS技术自身的优势使其被广泛运用于中药及复方多成分的鉴定和质量评价。

由于具有独特结构类型的化合物和多种重要的生物活性，近年来东革阿里一直备受国内外学者的关注。目前，东革阿里的研究主要集中在化学成分的提取分离、少数成分的定量分析和药理毒理方面，关于东革阿里及其制剂中化学成分的综合定性鉴别却鲜有报道，国内也未见这方面的文献，因此有必要建立一种快速、高效全面阐明东革阿里化学成分的分析方法。

发明内容