[发明专利]一种快速鉴定东革阿里化学成分的方法

权利要求书

1.一种快速鉴定东革阿里化学成分的方法，所述东革阿里化学成分包含苦木素二萜类化合物、生物碱类化合物、木脂素类化合物和角鲨烯衍生物类化合物，其特征在于，包括以下步骤：

供试品溶液制备：将东革阿里粉碎过筛，得到东革阿里粉末，提取，离心分离，取上清液，减压浓缩，微孔滤膜过滤，得到供试品溶液；

对照品溶液制备：取对照品，精密称定，置于棕色量瓶中，加入甲醇，超声助溶，冷却至室温后定容，即得对照品贮备液；精密吸取所述对照品贮备液于棕色量瓶中，以甲醇稀释至刻度，得混合对照品溶液；取所述混合对照品溶液微孔滤膜过滤，得到对照品溶液；

采用超高液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱UPLC-Q-TOF-MS分析技术对供试品溶液和对照品溶液分别进行分析，得到供试品溶液和对照品溶液中色谱质谱峰对应化合物的保留时间、准分子离子峰及二级碎片离子信息，比对得到供试品溶液所含化合物的可能结构；以及

采集所述供试品溶液和对照品溶液的一级质谱数据和二级碎片信息，根据所述一级质谱数据确定精确分子质量和可能的分子式，根据所述二级碎片信息解析所述化合物的可能结构，并结合供试品溶液和对照品溶液所述二级质谱碎片离子裂解规律进行化合物类别归属，得到化学成分鉴定结果。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取为往5g东革阿里粉末中加入体积百分比为0～30％的乙醇水溶液100mL于60～90℃水浴中加热提取3次，提取时间为1～5h。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对照品包括宽缨酮、13α-(21)-环氧宽缨酮、东革内酯、14,15β-dihydroxyklaineanone、β-咔巴啉-1-丙酸和9-甲氧基-铁屎米-6-酮。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱UPLC-Q-TOF-MS分析技术的色谱条件为：色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18 RRHD柱，流动相A为0.1％甲酸，流动相B为乙腈，梯度洗脱程序如下：(0～3min)5％流动相B，(3～20min)5％～30％流动相B，(20～32min)30％～98％流动相B，(32～35min)98％流动相B，(35～40min)98％～5％流动相B，(40～45min)5％流动相B；流速：0.2mL/min，柱温：40℃，检测波长：254nm，进样量1μL。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱UPLC-Q-TOF-MS分析技术的质谱条件为：ESI离子源，采用正离子检测模式；鞘气温度：350℃，鞘气流速：11.0L/min；喷嘴电压：500V；毛细管电压：3500V；雾化气压力：35psig；干燥气温度：320℃，干燥气流速：8.0L/min；毛细管出口电压：115-155V；Skimmer电压：65V；八级杆电压：750V；全扫描模式采集，扫描范围m/z 100～800。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述毛细管出口电压为135V。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述采集供试品溶液和对照品溶液二级质谱碎片时的碰撞能为10V～40V。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述采集供试品溶液和对照品溶液二级质谱碎片时的碰撞能为15V～30V。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，精密吸取0.5mL所述对照品贮备液于棕色量瓶中，以甲醇稀释至10mL，得到浓度为0.1～10ppm的混合对照品溶液。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述东革阿里化学成分为：

苦木素二萜类化合物29种：5种C₁₈ laurycomalactone型二萜类、7种C₁₉eurycomalactone型二萜类、3种C₁₉ longilactone型二萜类、11种C₂₀eurycomanone型二萜类及3种C₂₀ klaineanone型二萜类；

生物碱类化合物15种：β-咔巴啉-1-丙酸、7-羟基-β-咔巴啉-1-丙酸、1-甲氧基甲基-β-咔巴啉、9种铁屎米-6-酮类生物碱、2种季铵类生物碱和1种铁屎米-5,6-二酮类生物碱；

联苯新木脂素类化合物3种：2,2'-二甲氧基-4-(3-羟基-1-丙烯基)-4'-(1,2,3-三羟丙基)-二苯醚、2-羟基-3,2',6'-三甲氧基-4'-(2,3-环氧-1-羟丙基)-5-(3-羟基-1-丙烯基)联苯和2-羟基-3,2'-二甲氧基-4'-(2,3-环氧-1-羟丙基)-5-(3-羟基-1-丙烯基)联苯；以及

角鲨烯型三萜化合物1种：11/14-deacetyl eurylene。