[发明专利]一种适用于秸秆微贮的乳酸菌菌剂及其制备工艺

说明书

本发明公开了一种适用于秸秆微贮的乳酸菌菌剂及其制备工艺,属于家畜饲料中的秸秆微贮技术领域。本发明通过将植物乳杆菌和屎肠球菌分别发酵培养，并高速离心收集菌泥，收集到的菌泥按照活菌数2:1.5‑2的比例进行混合；以非脂乳固体含量≥8.5％的脱脂纯牛奶作为介质与保护剂混合成为复合保护剂，该复合保护剂与2种菌的混合菌泥按照体积比1‑1.5:1进行充分地混合；混匀后的菌泥液体分装到2000ml冻干盘中，每个冻干盘中分装800‑1000ml菌泥液体，‑30～‑40℃预冷冻2h，然后转入冻干机中并设置特定的工艺参数进行冻干。该发明制备的冻干粉的存活率达到90.09％，有效活菌数4.80×10¹¹CFU/g。

技术领域

本发明属于家畜饲料中的秸秆微贮技术领域，尤其涉及一种适用于秸秆微贮的乳酸菌菌 剂及其制备工艺。

背景技术

微贮是通过乳酸菌的增殖，将原料中的发酵底物转化成乳酸等酸性物质，维持酸性厌氧 环境，以利于微贮作物长期保存的一种贮藏方式。微贮饲料颜色黄绿、气味酸香、柔软多汁、 适口性好，在畜牧业生产中广泛应用，尤其在反刍动物饲养中，已成为重要的优质粗饲料来 源。与牧草晾晒成干草相比，牧草微贮可以大幅度缩短从收割到贮藏的时间，避免不良天气 造成的饲草损失，使青绿饲草的营养成分得到最大限度的保存。

目前在黑龙江省，每年便会产生约为4千万吨的玉米秸秆，但当地农民却不能有效地利 用秸秆，玉米秸秆的处理方式多为焚烧或随意丢弃，且这种处理方式会造成严重的环境污染 (如雾霾的频发)和资源浪费。与此同时，黑龙江还是畜牧大省，仅牛就有约5百万头，但 饲料化的秸秆量不仅不足，且质量不优。

很多事实表明，玉米秸秆用微贮发酵的方法发酵后，会变成一种含有酸香气味、牲畜爱 食且易消化的粗饲料。这样的处理方法，在一定程度上不仅解决了上述问题，而且还会带来 巨大的经济效益。而乳酸菌在微贮发酵的过程中，有很重要的作用，会直接影响微贮饲料制 备的好坏。由于玉米秸秆自身所携带的乳酸菌数量较少，无法在微贮发酵过程中发挥作用， 会严重影响微贮饲料的制备，因此需要额外添加乳酸菌才能保证生产出高品质的微贮饲料。 乳酸菌是近年来正在推广的微贮微生物添加剂，其主要作用是调节微贮物料内微生物组成， 迅速成为优势菌群，竞争抑制有害微生物生长，快速转化有限的糖分，显著地降低微贮pH 值，从而有效提高微贮饲料的质量，具有较大潜力和广阔的发展前景。

目前市售的微贮乳酸菌添加剂是常温乳酸菌，其最适生长温度一般都高于15℃，当气温 低于此温度时，就会生长代谢迟缓，导致发酵延迟、甚至停滞，不适于黑龙江省玉米秸秆微 贮饲料制备时的环境温度。而大面积修建发酵车间或提供持续供暖系统投入量大，不符合实 际发展现状。

而且乳酸菌多以冻干粉的形式供应市场，但乳酸菌直接进行冷冻干燥时很容易衰退失活， 活菌稳定性低。目前，对微贮乳酸菌的研制主要集中在植物乳杆菌等单一菌种，而且冻干粉 有效活菌数低，存活率低。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种适用于秸秆微贮的乳酸菌菌剂，该乳酸菌菌剂 由植物乳杆菌LP-1522和屎肠球菌Ef0518混合冻干粉组成，所述的植物乳杆菌菌株LP-1522 于2015年2月4日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为 CGMCC No.10516，分类学命名为Lactobacillus plantarum；所述屎肠球菌菌株Ef0518于2018 年05月31日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.15833，分类学命名为Enterococcus faecium；所述植物乳杆菌菌株和屎肠球菌菌株的保藏 地址都为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

本发明还提供了一种适用于秸秆微贮的乳酸菌菌剂的制备工艺，该方法包括如下步骤：

(1)对植物乳杆菌LP-1522和屎肠球菌Ef0518分别使用发酵罐进行规模化培养；