[发明专利]以氧化透明质酸为交联剂的壳聚糖多肽衍生物自交联水凝胶的制备方法及应用

权利要求书

1.一种以氧化透明质酸为交联剂的壳聚糖多肽衍生物自交联水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)氧化透明质酸的制备：取一定量的透明质酸加水溶解得到透明质酸溶液，取一定量的高碘酸钠溶于水中配成均一的溶液，再逐滴加入透明质酸溶液中，在一定温度下避光反应一定时间后再加入乙二醇，终止反应，最后经透析、冷冻干燥，制得氧化透明质酸；

(2)羧甲基壳聚糖的制备：使用碱溶液将壳聚糖碱化，加入异丙醇，搅拌均匀后调节至一定温度，再分批加入一定量的氯乙酸，继续搅拌至反应完全，反应结束后，待反应液冷却至室温，使用乙醇洗涤，再经过透析、干燥，制得羧甲基壳聚糖；

(3)羧甲基壳聚糖/胶原蛋白肽的制备：使用Na₂HPO₄/NaH₂PO₄缓冲溶液分别配制羧甲基壳聚糖溶液、胶原蛋白肽溶液和转谷氨酰胺酶溶液，配制完成后，在一定温度下搅拌反应，随后升温，使转谷氨酰胺酶失活，待反应液冷却至室温，依次经过过滤、透析、冷冻干燥，制得羧甲基壳聚糖/胶原蛋白肽；

(4)水凝胶的制备：分别配制羧甲基壳聚糖/胶原蛋白肽溶液和氧化透明质酸溶液，在一定温度下均匀混合，自交联得到水凝胶。

2.根据权利要求1所述的以氧化透明质酸为交联剂的壳聚糖多肽衍生物自交联水凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，透明质酸与高碘酸钠的质量比为1:0.3～3，在30℃下避光反应2h。

3.根据权利要求1所述的以氧化透明质酸为交联剂的壳聚糖多肽衍生物自交联水凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，制得的氧化透明质酸的氧化度为30％～60％。

4.根据权利要求1所述的以氧化透明质酸为交联剂的壳聚糖多肽衍生物自交联水凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，碱溶液为50％的氢氧化钠溶液，碱溶液与壳聚糖的质量比为1:1，在55℃下加入氯乙酸，壳聚糖与氯乙酸的质量比为1:1。

5.根据权利要求1所述的以氧化透明质酸为交联剂的壳聚糖多肽衍生物自交联水凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，制得的羧甲基壳聚糖为0.84。

6.根据权利要求1所述的以氧化透明质酸为交联剂的壳聚糖多肽衍生物自交联水凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中，Na₂HPO₄/NaH₂PO₄缓冲溶液的浓度为0.15～0.2mol/L，pH为5.5～6.0，羧甲基壳聚糖溶液的浓度为0.015～0.02g/mL，胶原蛋白肽溶液的浓度为0.01～0.02g/mL，转谷氨酰胺酶溶液的浓度为0.0015～0.002g/mL，在50℃下反应，升温至100℃以上使转谷氨酰胺酶高温失活。

7.根据权利要求1所述的以氧化透明质酸为交联剂的壳聚糖多肽衍生物自交联水凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中，制得的羧甲基壳聚糖/胶原蛋白肽的取代度为0.3～0.6。

8.根据权利要求1所述的以氧化透明质酸为交联剂的壳聚糖多肽衍生物自交联水凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中，氧化透明质酸溶液的浓度与羧甲基壳聚糖/胶原蛋白肽溶液的浓度相同，氧化透明质酸与羧甲基壳聚糖/胶原蛋白肽溶液混合的体积比为0.2～1:1，混合温度为0-50℃。

9.如权利要求1-8任一项所述的以氧化透明质酸为交联剂的壳聚糖多肽衍生物自交联水凝胶的制备方法制备的水凝胶在制备伤口敷料中的应用。

10.如权利要求1-8任一项所述的以氧化透明质酸为交联剂的壳聚糖多肽衍生物自交联水凝胶的制备方法制备的水凝胶在制备止血药物中的应用。