[发明专利]一种突变口蹄疫病毒感染性克隆及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201911065753.X | 申请日： | 2019-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN110791526B | 公开（公告）日： | 2021-10-08 |
| 发明（设计）人： | 吴香菊;杜以军;齐静;丛晓燕;隋超 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N7/00;C07K14/09 |
| 代理公司： | 北京索睿邦知识产权代理有限公司 11679 | 代理人： | 刘丽 |
| 地址： | 250100 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 突变 口蹄疫病毒 感染性 克隆 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种O型FMDV Tibet/CHA/99株、GenBank登录号：AJ539138 突变口蹄疫病毒感染性克隆，其特征在于其3C蛋白第51位、54位、110位、159位赖氨酸均突变为精氨酸。
2.一种权利要求1所述的突变口蹄疫病毒感染性克隆的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
根据GenBank登录号：AJ539138、O型FMDV Tibet/CHA/99株自身携带酶切位点将碱基序列分为A、B、C三段，通过RT-PCR扩增获得A、B、C三个片段，将A、B、C三个片段依次克隆入pBluescript II SK+载体构建有O型FMDV Tibet/CHA/99株全长cDNA的质粒pSK-AmBC，然后通过定点突变技术将3C蛋白第51、54、110、159位赖氨酸突变为精氨酸构建FMDV ICK5154110159R；将PacI酶线性化后的pSK-AmBC片段为模板体外转录后转染BHK-21细胞获得。
3.一种权利要求1所述的突变口蹄疫病毒感染性克隆或权利要求2所述的制备方法得到的突变口蹄疫病毒感染性克隆在抑制ISRE启动子活性中的应用。
4.一种权利要求1所述的突变口蹄疫病毒感染性克隆或权利要求2所述的制备方法得到的突变口蹄疫病毒感染性克隆在KPNA1降解中的应用。
5.一种权利要求1所述的突变口蹄疫病毒感染性克隆或权利要求2所述的制备方法得到的突变口蹄疫病毒感染性克隆在延长3C蛋白半衰期方面的应用。
6.一种权利要求1所述的突变口蹄疫病毒感染性克隆或权利要求2所述的制备方法得到的突变口蹄疫病毒感染性克隆在提高病毒滴度方面的应用。
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